如何用福尔马林固定过的标本做细胞周期？

niwanmao

福尔马林是医院病理科用于固定组织标本最常用的防腐剂，能够长期很好地保持细胞形态，可是，它却对使用流式细胞术回顾性检测这类组织标本DNA产生极大的困扰。因为福尔马林使组蛋白产生交联，从而影响碘化丙碇（PI）或其它DNA染料与DNA的结合，使得所有峰左移并且无法分清。

1994年W. Roy Overton在Cytometry杂志上介绍了一个好方法，供大家参考。

他们测试了数种溶液、多个温度条件，最后发现

对于福尔马林固定过的标本，解离成单细胞后，用Dulbecco's PBS重悬，75℃作用1小时，然后再进行常规PI染色，能够获得最佳的恢复效果。

图3福尔马林固定过的细胞株碘化丙碇染色荧光变化：选择了 T24、A673、SK-NEP-1三个细胞株，最上方一行代表新鲜细胞（未用福尔马林固定），作为正常周期对照，中间这行代表福尔马林固定过的细胞株，可见周期无法正常显示，最下方这行代表经过PBS 75℃加热1小时的标本，恢复近100％。


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Reversing. the Effect of Formalin on the Binding of u Propidium Iodide to DNA.pdf (583.77 KB, 下载次数: 22, 售价: 1 流星)

2015-3-31 16:16 上传

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indelx

感谢，非常合适我

oliverjd

太好了，这个方法简单实用个！

芒果果haha

感谢，太实用了