请问Golgi plug 与Golgi stop的区别?两者能否共同使用？

wswlijian

请问Golgi plug 与Golgi stop的区别?两者能否共同使用？

mylive

Golgi plug 包含布雷菲德菌素A，而Golgi stop包含莫能菌素，我之前试过两个一起用来刺激细胞，实验也能出来。

niwanmao

BD官方有一份关于细胞因子检测的FAQ，里面第3页清楚地写了两者的区别：
The major difference between these two inhibitors is where they work within a cell. BD GolgiStop (monensin) works by accumulation of protein at the endoplasmic reticulum (ER) stage, while BD GolgiPlug  (brefeldin) works with accumulation of protein at the golgi complex. The use of these inhibitors leads to an enhanced ability to detect cytokine-producing cells by intracellular flow cytometry.

简译之，就是说两者的作用部位不同，GolgiStop作用于内质网，将蛋白阻滞在内质网，而GolgiPlug则作用于高尔基体，使蛋白积累在高尔基体内。两者同用是没有问题的。


免费在线阅读FAQ：
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=Nzg5NXxlNDcyYzQyN3wxNzE1NDc3ODI4fDB8


下载FAQ PDF文件（1颗流星）：
cytokineFAQ.pdf (253.69 KB, 下载次数: 13, 售价: 1 流星)

2015-4-15 10:24 上传

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mylive

niwanmao 发表于 2015-4-15 10:27
BD官方有一份关于细胞因子检测的FAQ，里面第3页清楚地写了两者的区别：
The major difference between the ...

学习了！以前只知道能一起用，不知道其中的原理

wswlijian

niwanmao 发表于 2015-4-15 10:27
BD官方有一份关于细胞因子检测的FAQ，里面第3页清楚地写了两者的区别：
The major difference between the ...

非常感谢！

Jing310

niwanmao 发表于 2015-4-15 10:27
BD官方有一份关于细胞因子检测的FAQ，里面第3页清楚地写了两者的区别：
The major difference between the ...

老师，这个GolgiPluG，一般作用多长时间？说明书上写不超过12小时，我一般五六小时。还有想问下BD的这个555028胞内染色试剂盒怎么样，因为我做的IFN-γ染色结果一直不好。

niwanmao

Jing310 发表于 2016-11-24 10:33
老师，这个GolgiPluG，一般作用多长时间？说明书上写不超过12小时，我一般五六小时。还有想问下BD的这个5 ...

作用时间我觉得需要根据你要检测的因子检测效果而定，一般5～6小时应该也是够的。至于IFN-γ染不好，我觉得需要从刺激、抗体、破膜效果等多方面进行逐一排除。不知道你活化标记表达如何？

Jing310

niwanmao 发表于 2016-11-24 18:24
作用时间我觉得需要根据你要检测的因子检测效果而定，一般5～6小时应该也是够的。至于IFN-γ染不好，我觉 ...

我最近才知道要用活化抗体，以前用SEA刺激，最近买的PMA刺激，刺激一小时后，加高尔基体封闭，CD69和CD137都没阳性的，不知道什么原因，这胞内我已经做了小半年的，IFN-γ就是测不到阳性的，有也只有0.几。我只能再试试破膜时间了

niwanmao

Jing310 发表于 2016-11-29 14:28
我最近才知道要用活化抗体，以前用SEA刺激，最近买的PMA刺激，刺激一小时后，加高尔基体封闭，CD69和CD13 ...

我们研发了一种破膜剂，前期测试十几例胞内标记，效果都挺不错。
如果需要，我过段时间给你一点试试看。