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[凋亡检测] EGFP阴性细胞都死了

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发表于 2015-4-17 20:10:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
本帖最后由 fdgg012345 于 2015-4-17 20:11 编辑

QQ截图20150417195817.jpg
上图FLI-H是EGFP(慢病毒转染后自带荧光),用的是annexin v-apc和7-AAD试剂盒,死细胞很多,但奇怪的是死细胞都是EGFP阴性的,怎么解释啊?难道是细胞死后EGFP荧光淬灭了,但是做免疫荧光的时候固定后也没有淬灭啊。@niwanmao

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发表于 2015-4-17 20:28:25 | 显示全部楼层
病毒转染效率达不到100%的啊,可能你的标本中死细胞集中在EGFP阴性吧,是不是你的培养体系中出了什么问题?
EGFP阴性细胞中7-AAD阴性的也有,只是比例比较少。
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发表于 2015-4-18 10:07:46 | 显示全部楼层
还没来得及表达GFP就死了呗~
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发表于 2015-4-18 11:07:02 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2015-4-18 10:07
还没来得及表达GFP就死了呗~

或者就根本没转上
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发表于 2024-7-4 12:18:02 来自手机 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-4-17 20:28
病毒转染效率达不到100%的啊,可能你的标本中死细胞集中在EGFP阴性吧,是不是你的培养体系中出了什么问题 ...

老师,他这个会不会因为死亡(破膜打孔等)导致GFP蛋白溶出还是其他什么原因,最后导致细胞没有了荧光信号呀?我最近做ADCC,用GFP标记的肿瘤靶细胞,效应细胞为PBMC,共敷4h,实验组发现GFP的靶细胞变少了,多了一群FITC弱信号的细胞
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发表于 2024-7-4 14:05:35 | 显示全部楼层
粼泐粼 发表于 2024-7-4 12:18
老师,他这个会不会因为死亡(破膜打孔等)导致GFP蛋白溶出还是其他什么原因,最后导致细胞没有了荧光信 ...

死亡是会丢失的
GFP跟FITC同一通道,为什么说『实验组发现GFP的靶细胞变少了,多了一群FITC弱信号的细胞』呢?
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