流式凋亡和线粒体膜电位问题

199579524

老师，这是我的线粒体膜电位的图，第一幅是阴性对照，第二幅是空白对照，第三幅图是cccp阳性对照，第四幅是加药组，我的问题是：
    1.这个图该怎么看呢？每个数据代表什么意思呢？每个象限有什么意义？我统计数据该用哪个值呢？
    2. 我的后面各组感觉没得差异，这可能是什么原因造成的呢？

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这是我的凋亡图，第一幅是空白对照组，第二幅是毒性药组，后面三幅是加保护药物组，我的问题是：
    1. 为什么我的晚期凋亡比较多，早期凋亡比较少，这可能是什么原因引起的？
    2. 为什么我的凋亡图跟别人的不一样，晚期凋亡的点点分布感觉有规律，会不会是机器的问题呢？

谢谢。

199579524

怎么发布不起问题呢？？？好着急

niwanmao

199579524 发表于 2015-5-27 11:37
怎么发布不起问题呢？？？好着急

你问题发出来了，就是没有写内容。
现在可以点击“编辑”按钮，编辑原帖。

lipanfirst

为什么这几张凋亡的图那么相似啊 ？尤其是晚期凋亡的

niwanmao

你这里一共两个问题：
1、线粒体膜电位。我不明白你所谓的第二幅空白对照是指没有加药的还是什么标本？为什么也会有红光的降低？这不科学。正常的对照和分析方法应该如http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-188-1-1.html所示。

2、你这里的AV/PI双阳性应该是假的，可能是由于把死细胞圈进去造成或者非特异性荧光造成。可以说你的这几个标本几乎都没有凋亡。

stef1981

niwanmao 发表于 2015-5-27 20:52
你这里一共两个问题：
1、线粒体膜电位。我不明白你所谓的第二幅空白对照是指没有加药的还是什么标本？为什 ...

这两个都是在我们这里做的，回答一下这位学生和倪老师的问题：1、感觉她的空白对照也是加了药的，或者细胞状态太差，细胞明显分两群，红色荧光很弱。这个属于实验操作问题，附上一张最近别人做的较好的图


2、右上角的是晚期凋亡和死细胞，不是假阳性，凋亡分析的时候是应该算进去的，如果排除了就更没什么凋亡了，下面是她的FSC-SSC图，红色表示晚期凋亡或死亡细胞，蓝色为正常或早期凋亡细胞

niwanmao

stef1981 发表于 2015-6-1 10:34
这两个都是在我们这里做的，回答一下这位学生和倪老师的问题：1、感觉她的空白对照也是加了药的，或者细 ...

嗯，了解了，感谢反馈。

第2项检测的P1还是要排除掉好一些。