肿瘤浸润T淋巴细胞TIL的分离

曼爱生物 · 发表于 2015-6-14 17:01:02

有没有谁做过从小鼠肿瘤组织中分离TIL，有没有比较成熟的protocol，我是想分离之后培养几天做胞内因子染色分析IFN-g分泌的情况，但是做了好多次都分不到比较纯的淋巴细胞，而且大部分都还是肿瘤细胞，想问问分离完了还需不需要再用分选试剂盒把细胞分出来？！我现在的方法是:取出肿瘤组织，将其剪碎用胶原酶四和DNA酶消化30min，用60%（老师说应该70%？）和40%的percoll分离，分离后的细胞从大小上就看出来还是肿瘤细胞占多数，也尝试过用淋巴细胞分离液的方法，也分不出来。麻烦老师帮忙指点一下！

niwanmao · 发表于 2015-6-14 21:44:18

Ficoll和Percoll都是分离单个核细胞，不能特异性分离不同种类的细胞，你要分出纯淋巴细胞，还是需要用分选，磁珠分选或流式分选均可。

曼爱生物 · 发表于 2015-6-15 13:55:15

niwanmao 发表于 2015-06-14 21:44:18

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Ficoll和Percoll都是分离单个核细胞，不能特异性分离不同种类的细胞，你要分出纯淋巴细胞，还是需要用分选

好的，谢谢倪老师

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