流式分选后细胞培养问题

王娟

大家有没有用流式分选细胞用来培养的，我打算分选一下CD3+T细胞，结果用流式分选之后培养了2天，发现细胞都染菌了，染菌了大家都是怎么处理的？

小憨

用磁珠分吧，效果同样可靠，操作更简单。
流式分选确实容易污染。

王娟

小憨 发表于 2015-9-2 17:40
用磁珠分吧，效果同样可靠，操作更简单。
流式分选确实容易污染。

因为没有磁珠分选，所以目前只能用流式分

小憨

王娟 发表于 2015-9-6 08:20
因为没有磁珠分选，所以目前只能用流式分

而且你要注意，如果你是直接标记CD3的话，会直接激活T细胞的哦，我们一般是做阴选

vig娜娜

请问你们用流式分选原代的淋巴细胞 培养效果好么

王娟

小憨 发表于 2015-9-6 08:46
而且你要注意，如果你是直接标记CD3的话，会直接激活T细胞的哦，我们一般是做阴选 ...

你好，您的意思是说，淋巴细胞染CD3之后或使T细胞活化吗？具体是怎么活化呢？阴选又该如何做呢？感谢您的答复，目前在做免疫上，我还是个菜鸟，实验室我又是第一个开始做的，做的过程中也是各种问题，非常感激您的热心帮忙

王娟

vig娜娜 发表于 2015-9-10 10:54
请问你们用流式分选原代的淋巴细胞 培养效果好么

感觉分选后细胞的活力不是很好。

王娟

vig娜娜 发表于 2015-9-10 10:54
请问你们用流式分选原代的淋巴细胞 培养效果好么

感觉分选后细胞的活力不是很好。

小憨

王娟 发表于 2015-9-18 08:28
你好，您的意思是说，淋巴细胞染CD3之后或使T细胞活化吗？具体是怎么活化呢？阴选又该如何做呢？感谢您的 ...

T细胞体外活化的方法其中一种就是抗CD3和CD28的抗体刺激，CD3因为和TCR联合在一起，向T细胞传导活化的第一信号，CD28给予第二信号。阴选就是选择阴性的，也就是用一系列抗体的组合把其它非T细胞标记上，那阴性的就是T细胞，所以叫阴选（选择阴性的）。这种mix在各个抗体公司都有卖的

王娟

小憨 发表于 2015-9-18 15:01
T细胞体外活化的方法其中一种就是抗CD3和CD28的抗体刺激，CD3因为和TCR联合在一起，向T细胞传导活化的第 ...

那如果是直接染CD4抗体是不是就不会导致T细胞的活化呢？