小鼠组织CD16/32抗体封闭

lyen

求助各位：我需要做小鼠视网膜组织的流式分析。检测的目的细胞为视网膜中的淋巴细胞（病理条件下仅占视网膜总细胞的5%左右）。检测的抗体包括CD11b,CD45, CD16/32等。请问这种情况下，是否需要使用CD16/32抗体对样本进行封闭？如果进行封闭，是否会对我要检测的CD16/32造成影响？是否需要考虑将我需要检测的CD16/32这一标志物替换掉呢？

niwanmao

lyen 发表于 2015-11-25 21:44
再请教倪老师，您检测单核巨噬细胞不适用封闭的原因是什么呢? 一般检测T、B细胞不需要封闭，可是巨噬为何 ...

原理我说不出所以然，我在临床上用CD16在巨噬细胞上测出阴性，而同一个标本中的粒细胞上测出阳性，这说明CD16不会和巨噬细胞发生非特异性结合，所谓的巨噬细胞上有Fc受体导致抗体非特异性结合的传言不存在。

niwanmao

你要检测淋巴细胞，为什么用的抗体都是粒细胞的标记？

lyen

niwanmao 发表于 2015-11-2 19:29
你要检测淋巴细胞，为什么用的抗体都是粒细胞的标记？

确切的说，我应该是要筛选出极化的巨噬细胞，所以使用这些maker

niwanmao

lyen 发表于 2015-11-3 09:31
确切的说，我应该是要筛选出极化的巨噬细胞，所以使用这些maker

那么不是淋巴细胞喽。我个人的意见是不需要封闭，因为我们平时临床上也在用CD16检测单核巨噬细胞。

lyen

niwanmao 发表于 2015-11-3 19:45
那么不是淋巴细胞喽。我个人的意见是不需要封闭，因为我们平时临床上也在用CD16检测单核巨噬细胞。 ...

嗯嗯 谢谢倪老师！

lyen

niwanmao 发表于 2015-11-3 19:45
那么不是淋巴细胞喽。我个人的意见是不需要封闭，因为我们平时临床上也在用CD16检测单核巨噬细胞。 ...

再请教倪老师，您检测单核巨噬细胞不适用封闭的原因是什么呢? 一般检测T、B细胞不需要封闭，可是巨噬为何也可以不需要呢？如果选择封闭，那么是否会和使用CD16/32抗体冲突呢？不知道倪老师是否有相关资料或文献推荐，非常感谢！

lyen

niwanmao 发表于 2015-11-26 08:07
原理我说不出所以然，我在临床上用CD16在巨噬细胞上测出阴性，而同一个标本中的粒细胞上测出阳性，这说明 ...

好的！谢谢倪老师！