SP细胞分析

abcmax

最近试了一次Hoechst 33342弱染SP细胞，有些问题想请教大家。
做的时候不加PI染料为什么图形出不来(图1)？
加了PI染料出来图形但是很不好辨别SP细胞（图2）？
还有Hoechst 33342染料在375激发下，发射波长是一个还是两个？为什么在450/40,670LP波长下接收，分别为Hoechst blue和Hoechst red,我有点搞不懂？有经验的出出主意。谢谢。

niwanmao

我确实很想做一下SP细胞，只是一直没有配置UV的流式细胞仪可用。所以只能给你找点资料看看。

经典的图形应该如下的，Hoechst 33342被UV激发，主流发射波长是450，但是在670也可以被检测到。

至于不加PI为什么不出现图形，我在想，是不是跟染色步骤中哪个环节出问题有关？

附上protocol一份：
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=OTIyN3w4ZjUwOWY1MXwxNzQ3MTM1NjM5fDB8

abcmax

niwanmao 发表于 2015-12-29 21:03
我确实很想做一下SP细胞，只是一直没有配置UV的流式细胞仪可用。所以只能给你找点资料看看。

经典的图形应 ...

谢谢倪老师。