cell staining buffer

yelinghao215 · 发表于 2016-5-25 17:34:37

看到流式抗体的说明书，说染色的时候需要用cell staining buffer，上网在biolengend网站上查了一下500mL要1000多人民币，这个溶液可以自己配吗？找了很多资料，大致说是PBS+1%BSA+0.1%叠氮化钠，但是叠氮化钠剧毒不好买，那是不是可以不加呢？
还有一个小问题，就是说加抗体前要进行Fc block，我如果买了同型对照，还需要进行吗？谢谢！

niwanmao · 发表于 2016-5-25 17:34:38

现配现用，可以不加。

对于大多数抗体，Fc Block不太需要，除非非特异性染色很强。真需要用的话，同型对照不能替代Fc Block。

yelinghao215 · 发表于 2016-5-25 20:33:52

niwanmao 发表于 2016-5-25 20:27
现配现用，可以不加。

对于大多数抗体，Fc Block不太需要，除非非特异性染色很强。真需要用的话，同型对照 ...

非常感谢！

decade911 · 发表于 2016-5-27 00:33:02

niwanmao 发表于 2016-05-25 17:34:38

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现配现用，可以不加。

对于大多数抗体，Fc Block不太需要，除非非特异性染色很强。真需要用的话，同型对照

倪老师，加了bsa的pbs不加叠氮化钠的话大概能保存多久？时间长了似乎会有沉淀，是长菌了吗？跑流式时杂质很多。

niwanmao · 发表于 2016-5-27 12:23:35

decade911 发表于 2016-5-27 00:33
倪老师，加了bsa的pbs不加叠氮化钠的话大概能保存多久？时间长了似乎会有沉淀，是长菌了吗？跑流式时杂质 ...

加了BSA的话需要加叠氮钠，否则容易长菌。

decade911 · 发表于 2016-5-29 23:12:15

niwanmao 发表于 2016-5-27 12:23
加了BSA的话需要加叠氮钠，否则容易长菌。

确实是长菌沉淀了，严重影响分辨率。以后加BSA只能现配现用了。。。叠氮化钠不好买啊。。。

小憨 · 发表于 2016-5-31 11:25:24

我们是配好了分装然后-20冻起来，就不用加叠氮钠了

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