pi单染看细胞一定要细胞固定么？

eaglewood

pi只能染细胞膜破损细胞，那做pi单染色是细胞需要固定么？一旦固定细胞不就死透了，不是就全染色了么？我今天试了一下单染没有固定，和对照没什么区别大牛帮帮解惑一下吧

燕仔zoe

倪老师已经讲的很清楚啦。
如果只是鉴定活死细胞，就不用固定，如果你染了，没有阳性或者阳性很少，说明你的细胞里死细胞的比例很少。
如果是做周期检测，则必须固定，PI染料是不能透过细胞膜而染上DNA的，既然如此，何来线性的DNA分析。
另外重点注意的是，区分活死的PI染液浓度和做周期的PI染液浓度是不一样的。

niwanmao

PI直接染，是用于区分死、活细胞。
乙醇固定破膜后染，是用于检测细胞周期。
两种不同应用。

eaglewood

我就是这么想的所以我认为pi单染不用固定，我过400目的滤网，离心，去上清加pbs，加pi，培养10分钟立马上机检测，结果没有任何变化啊，固定是样品保存才需要立马上机并且还是pi单染也需要固定么？

Arcrain

楼主想干什么都没说清楚........

eaglewood

我刚接触流式细胞检测，可能问题比较低级，多谢各位指导。