关于淋巴细胞设门问题

0903苏芯

以上是小鼠肺提取单个核细胞经过孵抗体等处理后上机所示，处理方法都是差不多的，最大的区别就是做的日期不一样，有前有后。例如第一张是2月23日上机的，当天上机的总共有三个样，基本上做出来的图形都和第一张图一样。同样3月1号做出来的三个样的图形都与图二一样，想问有没有大神知道为什么每天上的样会有这么大差异，这种差异跟当天流式机的状态有关吗？

niwanmao

流式仪器如果变异这么大，就说明仪器出问题了。一般说来，仪器正常运行情况下，不应该出现这种情况，尽管你每次处理方法都一样，但由于不同次提取的小鼠不同，处理上肯定也会有些差异，导致标本最终稳定性有所不同，这是最常见的原因。

Eileen

完全一样的细胞？处理方法差不多是差多少？图2看着像是电压没有调好 ssc应该再高一点

chymanhz

仪器多洗洗，看看管路有没有问题，另外看看FSC，SSC电压和激光器功率是不是有变化

0903苏芯

Eileen 发表于 2016-6-6 17:45
完全一样的细胞？处理方法差不多是差多少？图2看着像是电压没有调好 ssc应该再高一点 ...

就是除了小鼠不同以外其他没有什么不同

0903苏芯

niwanmao 发表于 2016-6-6 18:20
流式仪器如果变异这么大，就说明仪器出问题了。一般说来，仪器正常运行情况下，不应该出现这种情况，尽管你 ...

但是我觉得奇怪的就是假如我每天做三只老鼠的流式，这三只老鼠上样的图是差不多的，假如是因为小鼠不同，那应该是同一天上样的图会有所差别，而不是今天的三只小鼠上样的图差不多，但是今天上样的图和昨天上样的图相差很大啊

0903苏芯

chymanhz 发表于 2016-6-7 11:31
仪器多洗洗，看看管路有没有问题，另外看看FSC，SSC电压和激光器功率是不是有变化 ...

我们这边上机是老师操作，自己不能动机子，请问上机的时候一般在哪可以看到你说的那些值呢？我们是BD公司的流式细胞仪

niwanmao

0903苏芯 发表于 2016-6-7 12:00
但是我觉得奇怪的就是假如我每天做三只老鼠的流式，这三只老鼠上样的图是差不多的，假如是因为小鼠不同， ...

如果同一天三只小鼠都一样，说明仪器液路问题可能性大，建议做一下月维护，或者叫工程师来冲洗一下。

chymanhz

0903苏芯 发表于 2016-6-7 12:02
我们这边上机是老师操作，自己不能动机子，请问上机的时候一般在哪可以看到你说的那些值呢？我们是BD公司 ...

这个不好说啊，BD仪器太多种类的，你看到软件上有FSC/SSC旁边一个数值，可以拖动的

0903苏芯

niwanmao 发表于 2016-6-7 14:21
如果同一天三只小鼠都一样，说明仪器液路问题可能性大，建议做一下月维护，或者叫工程师来冲洗一下。 ...

嗯嗯，那老师想问一下就是如果是这种情况淋巴细胞设门怎么设好一点呢？是每天做的设一个门呢还是有其他方法呢？