流式参数求助（流式图上很多点都压线了）

bullfoo

今天重新在cantoII上面调了电压参数，调了荧光补偿，但是回来发现PE这个荧光很大一部分都压到底线了，之前其实也经常会出现，请问版上各位大大们，这个是怎么回事呢？ 为什么会压线呢？ PE荧光的电压也不小的，系统默认是500，我调到580了

niwanmao

应该是你在diva软件里面启用了双指数显示，所以在diva里面显示好的，回来在flowjo里面贴边了。可以在flowjo点击T按钮，change axis，改为biexp

bullfoo

niwanmao 发表于 2016-7-16 08:26
应该是你在diva软件里面启用了双指数显示，所以在diva里面显示好的，回来在flowjo里面贴边了。可以在flowjo ...

谢谢倪老师的回复，我重新看了下参数，发现我在flowjo软件上的这个biexponential transform已经是开着的，我off之后图片还是会有压线。
倪老师方便能再帮忙看下我昨天的原始数据吗？ 我昨天用的是PBMC，标记的方案是CD45 APC/cy7+CD4 APC+CD8 Percp/cy5.5+ CD19 PE/cy7+ CD20 FITC+ CD24 PE。CD24PE 的数据看上去很怪异，难道是全部阳性的，还是阳性阴性的分界应该在10^3那里？ 拜谢

niwanmao

bullfoo 发表于 2016-7-16 14:55
谢谢倪老师的回复，我重新看了下参数，发现我在flowjo软件上的这个biexponential transform已经是开着的 ...

打开Biex的设置界面，将extra negative或者width basis随便哪个挺大，就可以使大部分数据点都显示出来了。

972676742

niwanmao 发表于 2016-7-19 12:55
打开Biex的设置界面，将extra negative或者width basis随便哪个挺大，就可以使大部分数据点都显示出来了 ...

倪老师，为什么在用NC管调好电压后，上样品后某些荧光通道的负轴会比NC管的负轴要大很多呢？

niwanmao

972676742 发表于 2016-7-19 13:58
倪老师，为什么在用NC管调好电压后，上样品后某些荧光通道的负轴会比NC管的负轴要大很多呢？ ...

原因不明，你可以对比一下细胞大小，如果偏移比较大，可能是流式机器不稳定或液路存在气泡等原因。需要综合考虑一下。

W3YC

niwanmao 发表于 2016-7-19 12:55
打开Biex的设置界面，将extra negative或者width basis随便哪个挺大，就可以使大部分数据点都显示出来了 ...

倪老师
用双对数调节后，不压线了
但是坐标轴出现了负数
这个是不是提示电压没有调好呢？
影响大吗

niwanmao

W3YC 发表于 2018-11-27 23:07
倪老师
用双对数调节后，不压线了
但是坐标轴出现了负数

电压偏低造成的，但不是特别大的问题。