关于侧群分选的一些问题，求老师们指点

柔软的胖子

最近看了一些侧群分选的文章，理解不是很深，想请老师讲一下，P1(黑色) P2（蓝色） P3（红色） P4（绿色）分别代表的是细胞周期中哪一阶段的细胞呢呢？

FIG.1

个人是这样理解的：P3为G2/M,P4为S,P1和P2为G0+G1，但是比较困惑的是为什么P1和P2会出现分群呢？是什么导致的？求大神们讲一下。

ghqiu09

看细胞周期应该是要用直方图的，更直观

niwanmao

你的理解应该是对的，这个页面的那个BrdU/Hoechst/PI部分关于Synchronized cells部分内容可能对你理解原理会有启发：
http://flowbook.denovosoftware.com/chapter-8-cell-proliferation

柔软的胖子

niwanmao 发表于 2017-5-15 19:54
你的理解应该是对的，这个页面的那个BrdU/Hoechst/PI部分关于Synchronized cells部分内容可能对你理解原理 ...

谢谢倪老师，那是不是P1和P2的差异是由于G0到G1之后由于准备复制，导致核酸有了一定性状上的改变，所以对HOECHST BLUE和HOECHST RED的亲和力有了一定程度的变化，才导致G0和G1出现分群的？

柔软的胖子

ghqiu09 发表于 2017-5-15 16:30
看细胞周期应该是要用直方图的，更直观

谢谢这位老师，我是在看这个图的时候比较好奇这个分群的原因。

ghqiu09

柔软的胖子 发表于 2017-5-16 08:59
谢谢这位老师，我是在看这个图的时候比较好奇这个分群的原因。

给我的感觉会不会是染料的原因，毕竟是两种不同的染料，和DNA的结合会不会有所不同？

柔软的胖子

ghqiu09 发表于 2017-5-16 09:55
给我的感觉会不会是染料的原因，毕竟是两种不同的染料，和DNA的结合会不会有所不同？ ...

一直在查资料，而且要纠正一下自己在4楼的说法，我要表达的意思是实验本身只用了HOECHST一种染料，但发射光却有两个波段。但是当我查询HOECHST的发射光谱时，却没有在红光区的发射光，这让我有点百思不得解。
另外看了几篇相关文章，其中都提及了PI的使用以区分死活细胞，但也明确了HOECHST确实有两个发射波段，真的是这样么?