jurkat 细胞凋亡

caochi

请问，分析细胞凋亡时为什么圈出的jurkat t 细胞会分出两个明显的群，如图, R1分成两个group? 在跑外周血阴性管时为什么也会出现这样的情况？谢谢解答！

niwanmao

左侧这群是由于标本保存问题造成细胞死亡的

caochi

好的，非常感谢！

samly0

跑jurkat细胞凋亡时，可以用反选功能，通过gate Annexin V/和PI的散点图上的右上或右下象限，反过来看凋亡细胞在FS/SS的的位置，可以帮你精确FS/SS圈门的位置，而且还可以帮助判断培养的细胞株是因为样本制备的问题还是经过培养发生了细胞分化导致的分群

didi_zhou

左边是膜通透性增加的死细胞，fs偏小。

顾惠惠_Iris

samly0 发表于 2017-7-27 16:20
跑jurkat细胞凋亡时，可以用反选功能，通过gate Annexin V/和PI的散点图上的右上或右下象限，反过来看凋亡 ...

可以举个例子具体说明一下吗？我们在实验的时候也受FSC-SSC精确圈门的困扰。我们会准备5个样本，空白的细胞（不作任何处理），对照组细胞（不加诱导剂）正常染色，试验组细胞（正常诱导）正常染色，还有两管单染调补偿；似乎完全用对照组细胞圈门或用空白组圈门都不是非常精确。请教一下你们怎么操作？

samly0

可以在Annexin V/和PI图里画一个门，只圈住双阳性晚期凋亡细胞（右上限的位置）或者圈住其他你感兴趣的细胞群，设个醒目点的颜色，然后在FS/SS图里看这种颜色的细胞大概再哪个位置，再调整FS/SS里的门的位置和大小。

顾惠惠_Iris

samly0 发表于 2017-8-2 12:11
可以在Annexin V/和PI图里画一个门，只圈住双阳性晚期凋亡细胞（右上限的位置）或者圈住其他你感兴趣的细胞 ...

好的 谢谢

jssdd

niwanmao 发表于 2017-7-26 19:45
左侧这群是由于标本保存问题造成细胞死亡的

倪老师，晚凋的细胞好像也会出现这左侧这个位置吧？

niwanmao

jssdd 发表于 2017-8-9 12:56
倪老师，晚凋的细胞好像也会出现这左侧这个位置吧？

标本保存不当造成的死亡中，也包括凋亡的，但这一群不全是凋亡。