哪些细胞需要进行Fc受体阻断？

niwanmao

在各种流式细胞术检测中，正确区分阳性和阴性十分重要。要实现阳性细胞群的良好区分，消除抗体的非特异性结合很重要，尤其是Fc受体非特异性结合抗体。

正因为如此，了解哪些细胞表面表达Fc受体就非常重要。Fc受体只表达在单核、巨噬细胞上面吗？我们来看一下下面这张表：


从这张表可见，Fc受体分为6个亚型，几乎涉及各类血细胞，单核、巨噬细胞勿庸质疑，郎罕氏细胞与他们有亲戚关系，也可以理解，中性粒细胞、NK细胞表面有CD16，也说的通，分万万没想到啊，血小板、B细胞、gdT细胞们，连你们这些细胞都有Fc受体啊。

所以筒子们，只要是非abT细胞的检测，都加上Fc阻断剂吧，可选阻断剂有：
（1）商品化的Fc Block（25ug/ml或10ug/ml）；
（2）2.5％或10%的人血清或小鼠血清；
（3）100ug/ml的人IgG。

表格部分资料编译自Roitt’s Essential Immunology，第13版

niwanmao

热心站友 张继全 在微信上的补充评论：

想做进一步说明如下：1，很多人及大鼠IgG亚型都可与小鼠Fc receptor有很好的结合，但小鼠IgG亚型对人Fc receptor的结合则差很多；2，因此，不论用什么种属的IgG染小鼠细胞，稳妥的办法是使用Fc block; 3, 也因此，染人细胞就不是太大的问题，可加可不加，很多专业文献也是不加。 以上是经验之谈（本人为小鼠immunology领域贡献了两个特异性细胞表面标记，Siglec-F for eosinophils and Siglec-H for plasmacytoid dendritic cells)

niwanmao

热心站友张继全在微信上的评论：

B细胞产生抗体，当然需要Fc:受体FcgR2B, 借以对B细胞产生反馈抑制。对此不必大惊小怪。 小鼠染色推荐Fc block, 并不推荐血清。拍着脑袋想想，细胞早在体内已exposed to血液了，血清block没有多大意义。

热心站友孙大千在微信上的评论：

大赞援引美国同事的口号“Fc block, make your data rock!"只补充一句，阻断剂应该和样本同源。

fcm117

倪老师，您好！血液中提取NK细胞，培养后做流式，需要封闭Fc受体吗？

niwanmao

fcm117 发表于 2018-4-25 15:16
倪老师，您好！血液中提取NK细胞，培养后做流式，需要封闭Fc受体吗？

最好封闭一下比较好。你们做什么抗体？

fcm117

niwanmao 发表于 2018-4-25 17:31
最好封闭一下比较好。你们做什么抗体？

CD56和CD3.

yueliangchulail

倪老师，您好！Fc阻断用胎牛血清可以吗？

niwanmao

yueliangchulail 发表于 2018-10-19 17:10
倪老师，您好！Fc阻断用胎牛血清可以吗？

可以，但效果不如BSA，BSA又不如商品化的Fc Blocking。

yueliangchulail

好的，Thanks♪(･ω･)ﾉ

心云慷慨812

请问如果要检测Fc，特别是和其他marker一起检测的话怎么办？（人的血清/组织免疫相关细胞样本）比如单核细胞，想看它Fc的表达，也想看功能表型。