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[白血病免疫分型] 检测病人的Tscm时,两种实验方案所得比例差别很大,求解?

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发表于 2018-1-20 17:49:59 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
两组Panel检测T细胞分型-Tnaive、 Tcm、Tem和Tscm,分别为:
  • CD3/CD45RA/CD62L/CD95
  • CD3/CD45RA/CD62L/CD122
结果两种组合的分型和比例差别很大,求解?

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发表于 2018-1-20 20:44:43 | 显示全部楼层
能把你两个方案的分析图形都放出来吗?TSCM应该是CD95+CD122+的,你这样分成两管做,如何圈双阳性的?
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 楼主| 发表于 2018-1-22 09:19:12 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-20 20:44
能把你两个方案的分析图形都放出来吗?TSCM应该是CD95+CD122+的,你这样分成两管做,如何圈双阳性的? ...

按照之前请教过您的,CD95或CD122按道理应该都可以吧
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 楼主| 发表于 2018-1-22 09:20:44 | 显示全部楼层
本帖最后由 amiser 于 2018-1-22 09:35 编辑
niwanmao 发表于 2018-1-20 20:44
能把你两个方案的分析图形都放出来吗?TSCM应该是CD95+CD122+的,你这样分成两管做,如何圈双阳性的? ...

只用四色能分析出吗?
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发表于 2018-1-22 14:17:44 | 显示全部楼层
amiser 发表于 2018-1-22 09:20
只用四色能分析出吗?

看明白了,CD95不分群,导致所有细胞都被认为是阳性。
你先把门去掉,看看是不是所有细胞都是CD95阳性了。从你这图形看,我的建议用CD122那个组合较好。
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 楼主| 发表于 2018-1-22 17:55:19 | 显示全部楼层
本帖最后由 amiser 于 2018-1-22 17:59 编辑

嗯,我也是觉得CD122比较合适,但是CD95未分群是什么原因?我把门去掉也大部分都是阳性
微信图片_20180122175825.jpg
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发表于 2018-1-22 21:01:03 | 显示全部楼层
amiser 发表于 2018-1-22 17:55
嗯,我也是觉得CD122比较合适,但是CD95未分群是什么原因?我把门去掉也大部分都是阳性 ...

正因为所有细胞都阳性,才说明有问题,至于背后的原因,可能只能猜测一二:
1、抗体滴度过高,导致分群不清?进行梯度稀释试试。
2、Fc受体结合CD95过强,预先进行Fc Blocking试试。
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 楼主| 发表于 2018-1-23 09:08:23 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2018-1-22 21:01
正因为所有细胞都阳性,才说明有问题,至于背后的原因,可能只能猜测一二:
1、抗体滴度过高,导致分群不 ...

嗯。谢谢倪老师!
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发表于 2022-11-19 20:47:30 | 显示全部楼层
倪老师,想问一下,我可以用CCR7+CD45RA+圈出Tn,然后从Tn里面圈CD45RO阳性作为Tscm吗
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发表于 2022-11-20 09:29:16 | 显示全部楼层
amiser 发表于 2018-1-22 09:19
按照之前请教过您的,CD95或CD122按道理应该都可以吧

这是那篇文章。
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