流式双染培养的NK细胞结果异常求教

89431 · 发表于 2018-9-21 12:18:30

各位大佬：能不能帮我分析下我这图里的问题？

仪器：贝克曼的DXFLEX ，质控做不过！

然后测的样本，结果见附件！是按照前人模板新建的实验，按SOP操作的，但结果很意外。不知道原因，求大佬解惑！

1图（NC）不加抗体；2图（CD3）加CD3单染；3图（CD56）加CD56单染；4图（Dual）加CD3+CD56双染

主要是4图的结果异常，找不到原因。

附件里还包含仪器的原始文件。

图4

图3

图2

图1

sunny2829 · 发表于 2018-9-26 11:36:13

单看数据，貌似没问题。是不是染料记反了，或者样本弄错了。NK标记是CD3-CD56+呀。
想问下你的CD3单染是怎么来的。

89431 · 发表于 2018-9-26 15:34:42

sunny2829 发表于 2018-9-26 11:36
单看数据，貌似没问题。是不是染料记反了，或者样本弄错了。NK标记是CD3-CD56+呀。
想问下你的CD3单染是怎 ...

首先非常感谢回复！染料没有记反，样本没有弄错。NK标记是CD3-CD56+，我都不知道

。我就是操作员，CD3单染试剂是公司买的，什么厂家信息什么的，我也没有。主要是别人做出来没问题，就我的每次都怪的很。仪器质控做不过会不会影响很大啊？

liuruiluna · 发表于 2018-9-27 07:13:21

质控不过要看看质控报告，不过的数据差在哪，差多少，如果质控问题大，对结果当然影响就大

liuruiluna · 发表于 2018-9-27 07:14:51

另外就是做阳性对照，如果别的对照显示正常，那就从这个的试剂查一查

tiger · 发表于 2018-9-27 08:35:23

图4和前三个不是同一份样品吧

tiger · 发表于 2018-9-27 09:04:50

图4与其他几个不是同一样品吧

89431 · 发表于 2018-9-28 10:14:35

tiger 发表于 2018-9-27 09:04
图4与其他几个不是同一样品吧

样本是一管分四支做的，是同一个样本

89431 · 发表于 2018-9-28 10:17:41

liuruiluna 发表于 2018-9-27 07:14
另外就是做阳性对照，如果别的对照显示正常，那就从这个的试剂查一查

试剂我觉得没问题的，因为后面做就正常了；质控偏差CV是5点几，也不算很大的。还有没有可能是其他什么问题？

liuruiluna · 发表于 2018-9-28 11:21:08

分析了一下你的数据，你这个是什么样本？密度梯度离心得到的的PBMC？

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[结构和原理] 流式双染培养的NK细胞结果异常求教