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[其它] 紧贴X轴底部的细胞是否该划入圈内

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发表于 2018-11-11 15:04:36 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
如图1, 图2 所示。
请教倪老师,各位,不知图2靠近X轴最底部的细胞是否该划入圈内, 怎样避免细胞紧贴X轴底部?



图 1

图 1

图 2

图 2
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发表于 2018-11-11 15:26:48 | 显示全部楼层
你这个方案一共标记了哪些抗体?Hoechst坐标可以用Logicle转换显示出来。
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 楼主| 发表于 2018-11-12 14:07:28 | 显示全部楼层
只有Hoechst 33258 和CFSE
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 楼主| 发表于 2018-11-12 14:24:43 | 显示全部楼层
Hoechst 染色后立即检测了,从添加Hoechst 到检测不超过10分钟。可否认为部分的活细胞没有染上Hoechst,导致值很低?
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 楼主| 发表于 2018-11-12 14:31:39 | 显示全部楼层
另外一个问题, CFSE染色的细胞死亡后,被其他白细胞吞噬,会再次染色该吞噬细胞吗?
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发表于 2018-11-12 21:43:18 | 显示全部楼层
luyexianzong 发表于 2018-11-12 14:24
Hoechst 染色后立即检测了,从添加Hoechst 到检测不超过10分钟。可否认为部分的活细胞没有染上Hoechst,导 ...

按照说明书,不同的细胞类型对应的条件如下:
Bacteria, 0.1 to 12 µg/mL, 10 to 30 minutes
Live animal cells, 0.2 to 5 µg/mL, 20 to 30 minutes
Fixed animal cells ,0.2 to 2 µg/mL ,1 to 15 minutes

至于CSFE染色的细胞如果被吞噬了,那么吞噬的细胞会有荧光发出。
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 楼主| 发表于 2018-11-13 00:21:16 | 显示全部楼层
Live animal cells, 0.2 to 5 µg/mL, 20 to 30 minutes.  我参考的是这个浓度。若短时间的话,小于20min,是否可以认为活细胞不被染色?
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