流式新手上路，凋亡结果不太明白

blp

请版主及高手帮忙诊断诊断，图片是对照组与处理组双染PE-annexin/7AAD流式图，问题：1、十字门位置是否正确，为什吗对照组凋亡率也是怎么高，是不是标本处理问题2、双染图细胞似乎没有分群，十字门如何划？3、结果能否判断诱导凋亡？

niwanmao

我记得C6的坐标轴范围非常大，你在FlowJo上用10E5的方，可能很多信号没显示出来。

blp

我试着更改成log axis，细胞群只是更加弥散，任然没有明显分群

blp

什么是C6？

niwanmao

blp 发表于 2018-11-22 15:27
什么是C6？

如果一开始做不好的话，建议先在人的单个核细胞，选择以下药物的一种，诱导凋亡，制备阳性对照，可以检验自己的操作步骤、获取和分析是否正确，以及试剂是否正常：

诱导药物	浓度
Doxorubicin hydrochlorid	0.2 µg/mL (用水配制25 µg/mL储存液）
Staurosporine	1 µM (用DMSO配制1 mM储存液)
Etoposide	1–10 µM (用DMSO配制1 mM储存液)
Camptothecin	2–10 µM (用DMSO配制1 mM储存液)
Paclitaxel	50–100 nM (用DMSO配制储存液)
Vinblastine	60 nM (用甲醇配制储存液)

blp

是的，重新再来，谢谢倪老师！