关于TH17检测

gdmcwjx2000 · 发表于 2010-11-4 22:23:48

1.做这方面的检测，需要细胞培养，是不是这些步骤都需要无菌呢？绝对无菌吗？
2.细胞培养是不是一定要使用RPMI1640,并含有小牛血清？

niwanmao · 发表于 2010-11-5 08:02:25

1、培养时当然需要无菌，否则细胞状态受到明显影响，你的结果还能准确吗？
2、细胞培养用什么样的培养基，是需要看你的细胞种类而定，比如贴壁细胞，就不是用1640培养基了，可以用DMEM等培养基。

jingweis530 · 发表于 2010-11-5 21:00:56

培养后的细胞做Th17检测时的步骤，如刺激细胞分泌Th17因子，破膜，染色等步骤是可以不需要无菌的。

new2002732 · 发表于 2011-4-28 14:57:31

赶着，内容很好的

new2002732 · 发表于 2011-4-28 15:00:38

我怎么细胞内染色，然不出来，不知道问题处在那里呢，是不是破膜洗液很重要，啊用什么稀释比较好，用pbs可以么

xx_ss · 发表于 2011-7-6 11:28:24

我也检测Th17，一直做不出~不知道原因在哪~也很想知道可能的问题在哪~希望高手能予以指教~

niwanmao · 发表于 2011-7-6 11:42:10

xx_ss 发表于 2011-7-6 11:28

登录/注册后可看大图

我也检测Th17，一直做不出~不知道原因在哪~也很想知道可能的问题在哪~希望高手能予以指教~ ...

可以按照这个图片的样式，把图发上来，讨论讨论，对于流式的问题，图片很重要：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =2428&fromuid=1

lizzie928 · 发表于 2011-7-7 21:51:27

我测Th17 表面抗原能测出来

samly0 · 发表于 2011-7-8 09:51:57

如果你培养的细胞真的有分泌IL-17等细胞因子的话，一般按说明书操作都能标记上的，测不出来的原因很可能和你的细胞状态有关，一是细胞没活化好，活化的T细胞镜下看会变大变圆的，折光性好，如果不是这样，当然检测不出来IL-17的分泌的，这个时候你再继续做就浪费试剂了，还不如重新养一版状态好的细胞，你可以试试调整TGF-b、IL-6等刺激因子的量，检测前8h到12h内加PMA、Ionomycin和Brefeldin A后再测看看吧

小憨 · 发表于 2015-6-10 08:19:55

我不知道你说的Th17检测是指哪方面？是在体外诱导分化？还是直接刺激后测细胞因子？
如果是诱导分化，可能时间要几天，就得无菌；如果是刺激后检测细胞因子，一般也不会超过6小时，可以不无菌，但建议加上双抗。
一般血液来源的悬浮细胞都用1640

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

关于TH17检测

点评

评分