FLOWJO 测周期出现疑问？

blp

各位老师好，我做的细胞周期测定，数据用flowjo处理，出现以下问题：
1.R1没有任何问题，R2出现y轴必须log，改line的话数据就跑丢了
2.圈完单个细胞后，出现周期峰，G1/G2比例还可以，接近2，但必须自定义里修改x轴
3.拟合曲线不好，拟合曲线与样本差距很大
哪位老师帮忙分析分析？

niwanmao

如果没有标记其他荧光素的话，那群你所说的必须log显示的信号是否为碎片？

blp

仅仅是PI, pe-W,A我是这样圈的，倪老师你看对吗？我调整下坐标轴就会好些，但每次都得调整，我担心是不是上机的数据不是太对，电压？但是G2/G1还可以，就是最后曲线拟合不太理想

niwanmao

blp 发表于 2019-3-30 19:07
仅仅是PI, pe-W,A我是这样圈的，倪老师你看对吗？我调整下坐标轴就会好些，但每次都得调整，我担心是不是上 ...

我的意思是这群细胞反设门在FSC/SSC上，是在哪个位置？

blp

倪老师，不好意思，回复晚了。
我是流式新手，原理理解不是太透，所以不是很懂你的问题。
我的步骤就是按上图走，首先FSC/SSC圈定R1,其次调整到PE-W/A,圈定R2,问题就是在设R2时，只能将PE-A调至log，先能像上图所示，如果改成linar，细胞群就偏出象限，无法圈定，在接下来在pe-A/Histogram时，也必须去costoms调整大小，最终得到的图pe-A/Histogram象限中pe-A必须log，这样曲线看得很窄，拟合曲线也不是太完美，我想知道是不是机器电压或是哪些参数没调好？

niwanmao

blp 发表于 2019-4-3 15:12
倪老师，不好意思，回复晚了。
我是流式新手，原理理解不是太透，所以不是很懂你的问题。
我的步骤就是按上 ...

下次获取的时候，改用LIN，然后把电压调下来试试。

blp

好，我在试试，多谢！