冻存PBMC分群

gongcei · 发表于 2019-3-31 12:02:27

最近第一次尝试用guava easy cyte来做流式，冻存后的PBMC跑出来感觉有两个分群，但是SSC高度一样应该不是monocyte的分群吧。用7-AAD染色以后前面那团容易被染色上。我在想是不是死细胞。但是MIX管CD3/4/8染色以后那团里面也有分群。我就特别迷茫。或许7-AAD染色时间太长假阳性了？那那团细胞又是什么（哭）？

qingshi · 发表于 2019-3-31 12:02:28

第一次试着回答一下，黑圈为死，黄圈淋系，红圈单核巨噬dc，没有粒细胞，可能是ficoll分离来源的。
不一定对哦，仅供参考。

niwanmao · 发表于 2019-3-31 19:16:08

建议圈右边这群，左侧这群无论是否能染的上，至少已经算是不好的细胞了

qingshi · 发表于 2019-3-31 19:20:11

或者红圈是粒细胞/::> /::>/::>/::>

gongcei · 发表于 2019-4-2 13:31:21

嗯嗯，谢谢老师们的回复^^ 这样我就放心多了呀
买的商业品冻存PBMC，应该是没有粒细胞的
主要售货方的流式技术斩钉截铁的说没有见过这样的结果，我就慌了
后来活率方面又和计数仪那边复核了一下，或许可能商业技术复苏活率较高所以这团细胞不明显，我们这边活率低了点所以特别明显吧

gongcei · 发表于 2019-4-2 13:34:07

qingshi 发表于 2019-3-31 12:02
第一次试着回答一下，黑圈为死，黄圈淋系，红圈单核巨噬dc，没有粒细胞，可能是ficoll分离来源的。
不一定 ...

谢谢你第一个回答^^

qingshi · 发表于 2019-4-7 12:09:43

gongcei 发表于 2019-4-2 13:34
谢谢你第一个回答^^

不客气，我整天捯饬pbmc，比较熟悉而已。

nikeyia10 · 发表于 2023-2-21 10:23:57

qingshi 发表于 2019-4-7 12:09
不客气，我整天捯饬pbmc，比较熟悉而已。

老师您好，冻存的PBMC，复苏后可以加PMA刺激检测Th吗？谢谢您的回答

niwanmao · 发表于 2023-2-21 13:31:52

nikeyia10 发表于 2023-2-21 10:23
老师您好，冻存的PBMC，复苏后可以加PMA刺激检测Th吗？谢谢您的回答

这是没问题的，很多文献都是这么做的。

nikeyia10 · 发表于 2023-2-21 15:10:32

谢谢倪老师回复！Treg可以跟Th放在同一管里测吗？

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[凋亡检测] 冻存PBMC分群

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