流式抗体说明书

guo919370840 · 发表于 2019-7-16 10:57:06

我是流式小白，新买的一管抗体FITC-CD90，看不懂他这个说明是多少次的用量，只看是总体积是0.2ml，那么每次用量是多少呢？说明书上没写还是我没看懂

tiger · 发表于 2019-7-16 10:57:07

本帖最后由 tiger 于 2019-7-17 08:42 编辑

guo919370840 发表于 2019-7-16 14:45
老师您好，这个CD90浓度是0.5mg/ml 规格是0.1mg 0.2ml ，需要稀释到1ug/ml吗？还是不太明白。每 ...

每份样品用1ug(也就是2ul)，反应体系是100ul，1ug/0.1ml/1E6Cell/T。倪老师那是笔误，不是1ug/ml。如果滴定一下，估计1ul也可以。

guo919370840 · 发表于 2019-7-16 10:58:16

每次用量说明书上没写吗？

h951595223 · 发表于 2019-7-16 11:16:24

每个样0.5ug-1ug就可以了，换算一下就是每次1-2ul就够了

guo919370840 · 发表于 2019-7-16 11:26:03

h951595223 发表于 2019-7-16 11:16
每个样0.5ug-1ug就可以了，换算一下就是每次1-2ul就够了

请问一下，这个是说明书建议的吗？没看见说明书上有这个啊还是自己做实验滴定出来的呢？

niwanmao · 发表于 2019-7-16 14:00:33

guo919370840 发表于 2019-7-16 11:26
请问一下，这个是说明书建议的吗？没看见说明书上有这个啊还是自己做实验滴定出来的呢？ ...

大多数抗体使用终浓度是1ug/ml，可参考。但如果你需要准确的用量，建议滴定。

tiger · 发表于 2019-7-16 14:41:19

本帖最后由 tiger 于 2019-7-16 14:43 编辑

BD Pharmingen的抗体，一般是1ug/T/0.1ml，用2ul。当然滴定后会省不少抗体

guo919370840 · 发表于 2019-7-16 14:45:49

niwanmao 发表于 2019-7-16 14:00
大多数抗体使用终浓度是1ug/ml，可参考。但如果你需要准确的用量，建议滴定。 ...

老师您好，这个CD90浓度是0.5mg/ml 规格是0.1mg 0.2ml ，需要稀释到1ug/ml吗？还是不太明白。每个样品根据说明建议用量能确定吗？

niwanmao · 发表于 2019-7-17 11:02:01

guo919370840 发表于 2019-7-16 14:45
老师您好，这个CD90浓度是0.5mg/ml 规格是0.1mg 0.2ml ，需要稀释到1ug/ml吗？还是不太明白。每 ...

不是稀释，是终浓度1ug/ml居多。
计算很好算啊，如果100ul样本里面加入1ul，就是5ug/ml，如果加入0.2ul，就是1ug/ml，0.2ul很难加的话，因为你用的是FITC，相对不容易受缓冲液影响，可用含BSA的PBS临时稀释，当天用完。但是，最优的用量，必须你滴定后才能确定，其他人无法帮你明确。

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[结构和原理] 流式抗体说明书

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