7AAD分三群，好神奇（图片更正后）

潘潘杰

最近在sorting小鼠脑细胞（全脑解离，当然会有破红等整个条件已经很稳定，最后得到脑细胞mix，有各种神经元胶质细胞等），最后一步，用500ulFACS buffer重悬，加6ul biolegend 7AAD，incubate6分钟后上机，然后就是如图，神奇的7AAD门变成了三群，原来其他实验都是两群，而且中间群主要是某一特定类胶质细胞（第四张图中所示的那一群细胞），这个paper中看过，所以很是好奇与不解，希望大家讨论下。

潘潘杰

可能图片顺序传反了，按照1234看就好，这种7aad最后分的很开的三群，确实没见过，所以中间那一群是活细胞还是死细胞呢？可是目的sorting的细胞就是中间那一群（7aad门），如果移开的话，那么图4那一群细胞完全为0.

不二佳2333

我最近也遇见过，7AAD分为三群，我对比了空白和单染，后来分选时把7AAD阴性和7AAD弱阳的都要了，下机后用台盼蓝检测了细胞活力，活力大于90%

niwanmao

不二佳2333 发表于 2021-1-21 15:35
我最近也遇见过，7AAD分为三群，我对比了空白和单染，后来分选时把7AAD阴性和7AAD弱阳的都要了，下机后用台 ...

看来弱阳的有可能是染色时间偏长造成的吧？