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[标本处理] 从人外周血分离中性粒细胞后,跑流式后中性粒细胞分两群

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发表于 2019-10-14 19:39:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
从人外周血分离中性粒细胞后,跑流式后中性粒细胞分两群,请问大大佬是怎么回事儿呢?还是说个体之间的差异呢?另外就是中性粒细胞激活后细胞群会发生变化吗?

下面是我做的流式图,请参考~

PMN.png
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发表于 2019-10-14 22:49:08 | 显示全部楼层
FITC是什么东西?
分两群,说明中性粒可能凋亡了。
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 楼主| 发表于 2019-10-15 09:21:56 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-14 22:49
FITC是什么东西?
分两群,说明中性粒可能凋亡了。

FITC是CD15,那老师您看看我跑的流式图,右边儿的一部分是凋亡的细胞吗?
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 楼主| 发表于 2019-10-15 09:22:56 | 显示全部楼层
老师,如果我想区分哪些是凋亡细胞,应该买什么试剂呢?
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发表于 2019-10-15 10:42:41 | 显示全部楼层
雅世倩仔 发表于 2019-10-15 09:22
老师,如果我想区分哪些是凋亡细胞,应该买什么试剂呢?

AnnexinV 法  测凋亡
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发表于 2019-10-15 11:46:30 | 显示全部楼层
雅世倩仔 发表于 2019-10-15 09:22
老师,如果我想区分哪些是凋亡细胞,应该买什么试剂呢?

很明显左侧那群是死亡细胞,最简单的办法是用PI(碘化丙啶)判断。
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 楼主| 发表于 2019-10-15 19:40:49 | 显示全部楼层
tiger 发表于 2019-10-15 11:46
很明显左侧那群是死亡细胞,最简单的办法是用PI(碘化丙啶)判断。

谢谢老师,凋亡细胞也能染上CD15吗?我的细胞怎么凋亡了那么多呢
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发表于 2019-10-15 22:03:06 | 显示全部楼层
雅世倩仔 发表于 2019-10-15 19:40
谢谢老师,凋亡细胞也能染上CD15吗?我的细胞怎么凋亡了那么多呢

凋亡细胞的细胞膜还是完整的,所以可以染上CD15
中性粒细胞的生存时间特短,所以比较容易发生凋亡。
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 楼主| 发表于 2019-10-15 22:08:41 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-15 22:03
凋亡细胞的细胞膜还是完整的,所以可以染上CD15
中性粒细胞的生存时间特短,所以比较容易发生凋亡。 ...

好的老师,那我是否可以直接用7-AAD Viability Staining Solution这个进行凋亡细胞的区分呢?
因为PI通道已经用了
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发表于 2019-10-15 22:15:07 | 显示全部楼层
雅世倩仔 发表于 2019-10-15 22:08
好的老师,那我是否可以直接用7-AAD Viability Staining Solution这个进行凋亡细胞的区分呢?
因为PI通道 ...

核酸染料是区分死活的。
要区分凋亡,还是需要用Annexin V抗体,并且需含钙离子的缓冲液。
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