请教MDSC圈门

圈圈圆圆圈圈

各位老师，我想从人外周血中想先圈出总的mdsc，可是流式结果里HLA-DR阴性的细胞比例却很高，请问各位老师原因可能是什么，处理标本时是用人外周血淋巴细胞分离液，以下是最近的一次流式结果，谢谢各位老师！

niwanmao

圈圈圆圆圈圈 发表于 2019-12-2 18:58
谢谢老师回复，我看到您之前回复别人的帖子里是圈出来cd16-的，可是老师我有一个疑问是
用淋巴细胞分离液 ...

Ficoll分离，理论上是只提取单个核，但大多数情况下，很难提纯的。

niwanmao

你这里圈出来都是中性粒细胞。
需要用CD16排除中性粒细胞。

lxk47640

1.抗凝剂最好是EDTA
2.抽血后不宜放置过久，尤其是在低温放置，最好常温放置2小时以内就分离PBMC
3.推荐用GE的PBMC分离液
4.先用健康人新鲜血液，保证分离的粒细胞比例降到1-5%以内（正常值范围）再考虑实验

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niwanmao 发表于 2019-12-2 17:40
你这里圈出来都是中性粒细胞。
需要用CD16排除中性粒细胞。

谢谢老师回复，我看到您之前回复别人的帖子里是圈出来cd16-的，可是老师我有一个疑问是
用淋巴细胞分离液之后还是会有很多的中性粒细胞么，第一个门里边的两群细胞是淋巴和中性粒么，谢谢

圈圈圆圆圈圈

lxk47640 发表于 2019-12-2 18:20
1.抗凝剂最好是EDTA
2.抽血后不宜放置过久，尤其是在低温放置，最好常温放置2小时以内就分离PBMC
3.推荐用G ...

刚开始做实验有很多不会，谢谢老师指导，请问老师应该怎么使粒细胞比例降到1-5%，谢谢

lxk47640

圈圈圆圆圈圈 发表于 2019-12-2 19:02
刚开始做实验有很多不会，谢谢老师指导，请问老师应该怎么使粒细胞比例降到1-5%，谢谢 ...

就是按我这4点推荐的做就行了