请问流式洗液有必要加入BSA吗？

sugarswallow · 发表于 2011-3-10 11:15:11

按照理论上来说PBS+0.5-1%BSA是较好的，但是，在实际操作中，加入BSA后溶液很容易有沉淀（漂浮物），倒是这个沉淀摇一下就会消失。毕竟FACS不是无菌操作的！有没有必要加入BSA？

niwanmao · 发表于 2011-3-10 11:18:45

按照标准操作是应该加的，但我平时不用。我觉得BSA对于表达量比较低的标记比较重要，因为这时排除这些非特异的结合尤为重要。
个人意见，仅供参考，请大家积极讨论。

stef1981 · 发表于 2011-3-10 14:56:18

以前也用过BSA，但是感觉用不用没什么影响

sugarswallow · 发表于 2011-3-10 16:09:34

正因为检测的时候不受影响，所以说现在基本上都不加！关键是很容易长毛毛，即使存放的时候放到4度。觉得弊大于利！

sugarswallow · 发表于 2011-3-10 16:13:19

估计还要加叠氮钠才行！防腐的，成分越多干扰因素越多，所以就是PBS了！

aninawang · 发表于 2011-3-11 21:26:30

加入BSA也是为了保护细胞的，一般情况下，我们处理好细胞很快就会上机检测，不加BSA的影响也不大，所以我们在实际应用中是不加的。

leidengfox · 发表于 2011-8-25 21:48:58

我有同学在第四军医大他们那里做流式都是用加入3%胎牛血清的PBS 其他的不加我感觉很多地方做法不一样比如他们那里都不固定我们这里就要求固定

niwanmao · 发表于 2011-8-26 09:05:21

leidengfox 发表于 2011-8-25 21:48

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我有同学在第四军医大他们那里做流式都是用加入3%胎牛血清的PBS 其他的不加我感觉很多地方做法不一样比 ...

是否固定，要看你的上机时间而定，如果你的标本要过夜，这时就需要固定。
BSA一般是为了减少背景。

chujindong · 发表于 2011-8-28 22:47:27

原来是这样，我一直认为BSA只是用来封闭非特异性结合位点的

niwanmao · 发表于 2011-8-29 07:59:56

chujindong 发表于 2011-8-28 22:47

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原来是这样，我一直认为BSA只是用来封闭非特异性结合位点的

是封闭非特异性结合位点的，就是因为封闭了这些非特异性结合的信号，所以才能起到减少背景信号的目的啊:)

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[结构和原理] 请问流式洗液有必要加入BSA吗？