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[其它] 请教:关于CD11b和F4/80检测小鼠巨噬细胞

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发表于 2020-3-30 12:05:45 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
本帖最后由 mybiosciences 于 2020-3-30 12:12 编辑

附图是BD网站上F4/80说明书里的一张图片,右图CD11b和F4/80双染,F4/80阳性细胞有两群,请问,这两群都是巨噬细胞吗?
以下是图片的说明Two-color flow cytometric analysis of F4/80 expression on mouse splenocytes. C57BL/6 mouse splenic leucocytes were preincubated with Purified Rat Anti-Mouse CD16/CD32 antibody (Mouse BD Fc Block™) (Cat. No. 553141/553142) and stained with PE Rat Anti-Mouse CD11b antibody (Cat. No. 553311/557397/561689) and either Alexa Fluor® 647 Rat IgG2a Isotype Control (Cat. No. 557690; Left Plot) or Alexa Fluor 647 Rat Anti-Mouse F4/80 antibody (Cat. No. 565853/565854; Right Plot). The two-color flow cytometric dot plot showing the correlated expression of F4/80 (or Ig Isotype control staining) versus CD11b was derived from gated events with the forward and side light-scatter characteristics of viable monocytes. Flow cytometric analyses were performed using a BD LSRFortessa™ Cell Analyzer System.

565853Image1.png
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发表于 2020-3-30 12:24:00 | 显示全部楼层
两群都是。

具体细分参见下图:
11.jpg

来源:https://iai.asm.org/content/76/12/5843/figures-only
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发表于 2020-6-1 15:46:59 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-3-30 12:24
两群都是。

具体细分参见下图:

老师您好,AM肺泡巨噬细胞和M1 M2 有什么关联吗? 我分析肺巨噬细胞,做intra 该圈那一个
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发表于 2020-7-16 20:24:02 | 显示全部楼层
我之前也跟大佬请教过类似问题,你可以参考。
F4/80在不同组织里面的定义不太一样,肿瘤脾脏里面mono的表达量不尽相同。在小鼠的很多肿瘤模型的肿瘤组织里面,我更倾向于F4/80++CD11b+是macrophage,F4/80dimCD11b+是MDSC或者monocytes。
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发表于 2020-7-16 21:03:03 | 显示全部楼层
毛豆24821 发表于 2020-7-16 20:24
我之前也跟大佬请教过类似问题,你可以参考。
F4/80在不同组织里面的定义不太一样,肿瘤脾脏里面mono的表达 ...

你说的对。对照2楼这张图应该是最强的那群是巨噬,中间这群弱表达的包括了单核和DC
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发表于 2022-3-14 20:19:02 | 显示全部楼层
老师我想问一下,如果染F40/80和CD206双色的话,是先染表面的F40/80,然后再破膜固定,再染胞内的CD206吗?
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发表于 2022-3-14 20:26:19 | 显示全部楼层
YC5125 发表于 2022-3-14 20:19
老师我想问一下,如果染F40/80和CD206双色的话,是先染表面的F40/80,然后再破膜固定,再染胞内的CD206吗? ...

是的
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发表于 2022-8-1 21:10:08 | 显示全部楼层
YC5125 发表于 2022-3-14 20:19
老师我想问一下,如果染F40/80和CD206双色的话,是先染表面的F40/80,然后再破膜固定,再染胞内的CD206吗? ...

您好,我想问一下您是用什么作为破膜剂和固定剂的,以及破膜和固定的时间是多久呢
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发表于 2022-8-1 21:30:18 | 显示全部楼层
bailiping 发表于 2022-8-1 21:10
您好,我想问一下您是用什么作为破膜剂和固定剂的,以及破膜和固定的时间是多久呢
...

市场上那些商品化的固定破膜剂都可以。
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发表于 2022-8-1 21:46:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-8-1 21:30
市场上那些商品化的固定破膜剂都可以。

我在做预实验的时候,没有固定,直接用1毫升0.2% Triton-X100,破膜10 min 没有收到细胞,是我破膜剂的浓度和时间不合适吗?
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