请教：流式细胞仪对植物叶片的倍性鉴定

zman

实验方法如下：

1) 取100 mg叶片组织， 加入1 mL预冷的解离液，用双面刀片快速切碎。

2) 通过30 µm尼龙膜过滤到1.5 ml离心管中,4°C 1000 rpm 5 min 离心纯化;

3) 弃上清液，加入250 uL PI（50 μg·mL-1），含RNAse（50 μg·mL-1），4℃冰箱避光染色30 min。

4) 通过CytoFlex流式细胞仪进行分析。

出现以下问题：

1)  离心产物有绿色沉淀

2) 加入 PI染液后出现絮状物

3) PE-A直方图好像只有碎片峰

请教：已经尝试更改解离液，以上问题没有改善，请问该如何调整实验方案？

直方图1

絮状物

直方图2

niwanmao

问题应该还是出在提取细胞核的步骤细节上，可参考Nature这个Protocol：
https://www.nature.com/articles/nprot.2007.310