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[淋巴细胞相关] 小鼠脑组织淋巴细胞分离后流式检测

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发表于 2020-6-8 20:13:50 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
本帖最后由 爱科学 于 2020-6-8 20:16 编辑

大家好,

最近在做小鼠脑组织淋巴细胞分离并进行流式检测CD3、CD4、CD8,但是一直很不顺利。小鼠脑组织分离后机械研磨,随后30%和70%percoll分离获得单个核细胞,进行流式检测。请问前辈,下图哪一群是淋巴细胞呢?还是压根就没得到淋巴细胞?

                               
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 楼主| 发表于 2020-6-8 20:14:47 | 显示全部楼层
本帖最后由 爱科学 于 2020-6-8 20:16 编辑

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发表于 2020-6-9 08:21:58 | 显示全部楼层

可以上个脾细胞或外周血获得的细胞,看细胞的位置,一致的话应该就是你要的细胞
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 楼主| 发表于 2020-6-10 16:52:26 | 显示全部楼层
这是我外周血染色的结果
PBMC.jpg
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 楼主| 发表于 2020-6-10 16:54:01 | 显示全部楼层
这是今天又重复了一次脑组织淋巴细胞的流式结果
30-70.jpg
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发表于 2020-6-11 09:08:16 | 显示全部楼层
本帖最后由 tiger 于 2020-6-11 09:09 编辑
爱科学 发表于 2020-6-10 16:54
这是今天又重复了一次脑组织淋巴细胞的流式结果

建议你不要密度梯度分离,既繁琐效果又不好,用CD45圈淋巴细胞。
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 楼主| 发表于 2020-6-14 14:51:45 | 显示全部楼层
tiger 发表于 2020-6-11 09:08
建议你不要密度梯度分离,既繁琐效果又不好,用CD45圈淋巴细胞。

不分离的话不会有很多碎片吗
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发表于 2020-6-14 19:13:03 | 显示全部楼层
爱科学 发表于 2020-6-14 14:51
不分离的话不会有很多碎片吗

碎片是很容易排除的。
Ficoll分离组织的话,很多时候条件会有点轻微变化,容易导致效果不好。
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 楼主| 发表于 2020-6-17 19:48:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-6-14 19:13
碎片是很容易排除的。
Ficoll分离组织的话,很多时候条件会有点轻微变化,容易导致效果不好。 ...

没有分离的话,全是碎片,根本无法看到细胞
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