小鼠肺部颗粒物造模及肺泡灌洗液流式吸入的细颗粒被认为会通过颗粒向肺部的沉积而引起慢性肺部炎症。为了研究细颗粒对肺的影响，需要将颗粒悬浮液滴入肺中。
最近，许多研究表明，诸如柴油机废气颗粒，沙尘和颗粒物2.5（PM 2.5）之类的颗粒污染物与导致肺癌或过敏性哮喘的慢性肺部炎症有关。流行病学分析表明，空气中颗粒物污染的增加与哮喘住院治疗的增加有关。通常，吸入后，已知细颗粒（例如PM 2.5）会深入肺部。将微粒悬浮液滴入肺已被广泛用于理解由沉积微粒引起的肺部炎症（Morimoto et al。，2016）。
这里使用的是明矾悬浮液滴灌，使用刮铲作为压舌板，然后将注射器插入喉咙，检查气管（为了轻松找到气管，首先使用刮铲和注射器将小鼠的舌头伸出）。当幼鼠用于实验时，很难看到气管。由于老年雄性小鼠较大，因此特别易于训练时更容易找到气管。然后，将矾的悬浮液缓慢滴向气管。通过呼吸将滴下的悬浮液吸入肺中。
鼻内给药对肺部给药也有效。如图5所示，握住麻醉的小鼠，将30μl（每个鼻孔中15μl）的颗粒悬浮液滴入鼻子。滴下的悬浮液也会通过呼吸吸出。通常，已知在给药中有30μl溶液到达肺部。
结果对比：
上面是压舌头感染，下面是滴鼻感染。
在向肺部施用明矾后3天，观察到肺泡巨噬细胞数量的变化。已知明矾通过吞噬巨噬细胞来诱导细胞死亡。如图7所示，将明矾直接注入肺后，支气管肺泡灌洗液（BALF）中肺泡巨噬细胞（CD11c +和siglec F +细胞）的百分比显着降低。
来自盐水或明矾施用的小鼠的BAL细胞的FACS分析。收集BAL细胞并用抗CD11c和抗Siglec F抗体染色（将BAL细胞中的白细胞选为CD45 +细胞）。A.来自盐水施用小鼠的BAL细胞。B.来自明矾施用的小鼠的BAL细胞。该数据代表至少两个独立的实验（n = 4-5）。
以上内容来自 Kuroda, E., Morimoto, Y. and Ishii, K. J. (2017). Instillation of Particulate Suspensions to the Lungs. Bio-protocol 7(22): e2618. DOI: 10.21769/BioProtoc.2618.
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发表于 2020-9-5 14:51:22
发表于 2020-9-7 08:52:12
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