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如何给鸡评估免疫力?

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 楼主| 发表于 2020-9-18 16:55:54 | 显示全部楼层 |阅读模式

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白细胞总数(WBC)计数和WBC亚群的分化是人类和动物的重要研究和诊断工具。然而,在禽类中,由于禽类红细胞裂解比较困难,而且禽类红细胞和血小板细胞的核与WBC的核相互干扰,因此目前自动血液分析仪测定血细胞也不容易做到。同样,由于密度相近,先用慢速或密度梯度离心分离红细胞和白细胞,也会导致WBC的损失。由于这些原因,禽类血液学长期以来一直局限于耗时、耗力和不精确的显微技术。

为了克服这一障碍,Burgess和Davidson率先证明鸡的淋巴细胞可以通过流式细胞仪用单克隆抗体和荧光珠定量检测全血(Burgess SC, Davison TF. Counting absolute numbers of specific leukocyte subpopulations in avian whole blood using a single-step flow cytometric technique: Comparison of two inbred lines of chickens. J Immunol Methods 1999; 227 (1-2): 169–176.)。最后,Seliger等人成功地建立了一种流式细胞仪技术,允许快速和准确地识别和量化鸡血细胞,而无需事先进行细胞裂解、细胞分离或细胞洗涤步骤(Seliger C, Schaerer B, Kohn M, Pendl H, Weigend S, Kaspers B, et al. A rapid high-precision flow cytometry based technique for total white blood cell counting in chickens. Vet Immunol Immunopathol 2012; 145 (1-2): 86–99.)。2020年8月24日Tanja Hofmann等人在Cytometry A上发表了一篇文章,提出新的方案,分别针对全血、脾脏、泄殖腔扁桃体的细胞成份进行了考虑,能同时计数总白细胞、血小板、单核细胞/巨噬细胞、由细胞毒性T细胞(CTL)和NK细胞组成的CD8α+淋巴细胞、由T辅助细胞(TH)和调节性T细胞(Tregs)组成的CD4+T细胞、γδT细胞,和鸡脾脏中的B细胞以及鸡泄殖腔扁桃体的CD8α+淋巴细胞、CD4+T细胞、γδT细胞和上皮内淋巴细胞(IEL)中的B细胞。

方案
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设门方法
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对于禽类免疫状态的研究,流式细胞术的应用是一个重要的进步。

参考文献:Hofmann T, Schmucker S. Characterization of Chicken Leukocyte Subsets from Lymphatic Tissue by Flow Cytometry [published online ahead of print, 2020 Aug 24]. Cytometry A. 2020;10.1002/cyto.a.24214. doi:10.1002/cyto.a.24214
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