淋巴细胞增殖抑制实验 CFSE 染色咨询

开心小松鼠 · 发表于 2021-2-15 10:33:16

图一是淋巴细胞未染色的阴性管图二是CFSE染色的淋巴细胞阳性管图三是经过干细胞抑制淋巴细胞增殖的检测管。我的问题是我这样设置实验方案是否合理？图三的结果能说明已经抑制淋巴细胞增殖了吗？新手上路感谢各位老师解答！谢谢。

niwanmao · 发表于 2021-2-15 10:33:17

从第三幅图看，比第二幅图的子代明显增高很多，看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显的碎片，感觉细胞状态并不好，所以子代峰还是存疑的。建议必要时，加一个淋巴细胞特异性标记（如CD3）。

开心小松鼠 · 发表于 2021-2-17 12:46:20

niwanmao 发表于 2021-2-15 19:57
从第三幅图看，比第二幅图的子代明显增高很多，看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显 ...

倪老师您好，加CD3标记是做什么用我刚入流式是小白请您多指教非常谢谢！

niwanmao · 发表于 2021-2-17 18:07:14

开心小松鼠发表于 2021-2-17 12:46
倪老师您好，加CD3标记是做什么用我刚入流式是小白请您多指教非常谢谢！ ...

使得目标细胞群的选择更纯。

开心小松鼠 · 发表于 2021-2-18 18:12:28

niwanmao 发表于 2021-2-15 19:57
从第三幅图看，比第二幅图的子代明显增高很多，看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显 ...

有没有这样的可能，增殖了但是增殖数量不多？

niwanmao · 发表于 2021-2-18 18:58:10

开心小松鼠发表于 2021-2-18 18:12
有没有这样的可能，增殖了但是增殖数量不多？

主要是有较多碎片圈进去的话，容易在阴性区域出现假的子峰。所以这就是我前面建议加CD3的原因。

开心小松鼠 · 发表于 2021-2-19 14:56:18

好的感谢指教

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