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[结构和原理] 淋巴细胞增殖抑制实验 CFSE 染色咨询

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 楼主| 发表于 2021-2-15 10:33:16 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
图一 是淋巴细胞未染色的阴性管   图二 是CFSE染色的淋巴细胞阳性管  图三 是经过干细胞抑制淋巴细胞增殖的检测管。 我的问题是 我这样设置实验方案是否合理 ?    图三的结果能说明已经抑制淋巴细胞增殖了吗?  新手上路  感谢各位老师解答!谢谢。

淋巴细胞未染色的阴性管

淋巴细胞未染色的阴性管

CFSE染色的淋巴细胞阳性管

CFSE染色的淋巴细胞阳性管

经过干细胞抑制淋巴细胞增殖的检测管

经过干细胞抑制淋巴细胞增殖的检测管

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从第三幅图看,比第二幅图的子代明显增高很多,看不出抑制增殖的趋势。 但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显的碎片,感觉细胞状态并不好,所以子代峰还是存疑的。建议必要时,加一个淋巴细胞特异性标记(如CD3)。
发表于 2021-2-15 10:33:17 | 显示全部楼层
从第三幅图看,比第二幅图的子代明显增高很多,看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显的碎片,感觉细胞状态并不好,所以子代峰还是存疑的。建议必要时,加一个淋巴细胞特异性标记(如CD3)。
 楼主| 发表于 2021-2-17 12:46:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-2-15 19:57
从第三幅图看,比第二幅图的子代明显增高很多,看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显 ...

倪老师您好 ,加CD3标记是做什么用   我刚入流式 是小白 请您多指教  非常谢谢!
发表于 2021-2-17 18:07:14 | 显示全部楼层
开心小松鼠 发表于 2021-2-17 12:46
倪老师您好 ,加CD3标记是做什么用   我刚入流式 是小白 请您多指教  非常谢谢! ...

使得目标细胞群的选择更纯。
 楼主| 发表于 2021-2-18 18:12:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-2-15 19:57
从第三幅图看,比第二幅图的子代明显增高很多,看不出抑制增殖的趋势。
但是第三幅图的FSC/SSC似乎存在明显 ...

有没有这样的可能,增殖了 但是增殖数量不多?
发表于 2021-2-18 18:58:10 | 显示全部楼层
开心小松鼠 发表于 2021-2-18 18:12
有没有这样的可能,增殖了 但是增殖数量不多?

主要是有较多碎片圈进去的话,容易在阴性区域出现假的子峰。所以这就是我前面建议加CD3的原因。
 楼主| 发表于 2021-2-19 14:56:18 | 显示全部楼层
好的  感谢指教
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