新人求助CAR-T-19细胞CAR+比例问题

雪雪球

如图，各位老师，CAR-T-19细胞阴阳界限不明显，且用无转染的细胞作对照组，结果发现并不能清晰的界定阳性细胞，怎么办？

对照组

这是对照组细胞

转导组细胞

这是转导组细胞，主要我在空白管发现对照组细胞和转导组细胞形态不同，我该怎么界定转导组细胞的CAR+比例呢？

sunny2829

阴性对照操作要和样本组一致。建议使用空载体转染后的细胞作为阴性对照

雪雪球

sunny2829 发表于 2021-2-20 10:33
阴性对照操作要和样本组一致。建议使用空载体转染后的细胞作为阴性对照

老师您好，请问用未转染的细胞作对照组是不合适的吗，CAR-T-19细胞一般用哪种抗体可以作为对照呢？

niwanmao

雪雪球 发表于 2021-2-20 16:19
老师您好，请问用未转染的细胞作对照组是不合适的吗，CAR-T-19细胞一般用哪种抗体可以作为对照呢？ ...

你用的抗体是什么？一般跟检测方法有关。
灵敏度高的话，分群还是不错的。

雪雪球

niwanmao 发表于 2021-2-21 09:11
你用的抗体是什么？一般跟检测方法有关。
灵敏度高的话，分群还是不错的。 ...

老师您好，是生物素-亲和素类抗体，两种抗体的品牌不一样，平时检测时经常呈连续性的表达

niwanmao

雪雪球 发表于 2021-3-18 15:11
老师您好，是生物素-亲和素类抗体，两种抗体的品牌不一样，平时检测时经常呈连续性的表达
...

你可以参考我在：
2020综述：流式细胞术在CAR-T治疗中的应用
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8479-1-1.html

这篇帖子中提到的检测方法里面，找更好区分CAR+ 细胞群体的方法。这个分群不好的方法，还是尽量放弃吧。

雪雪球

niwanmao 发表于 2021-3-18 15:55
你可以参考我在：
2020综述：流式细胞术在CAR-T治疗中的应用
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8479-1 ...

好的，谢谢老师