PI/SYTO双染细菌，活菌亚群为什么出现小尾巴

shenzc

各位大佬，我最近在做乳酸菌（革兰氏阳性）的活死亚群分布实验，使用的是SYTO-13和PI的染料，来自invitrogen
发现SYTO-13和PI双染培养的乳酸菌，活菌亚群会出现小尾巴


SYTO单染的时候没有这个小尾巴


各位老师，PI染料不能进入活细胞的细胞膜，但是会对SYTO染色的细胞产生干扰吗？这是什么原因呢？

niwanmao

这些应该就是PI+的死菌才对吧

shenzc

niwanmao 发表于 2021-3-24 21:00
这些应该就是PI+的死菌才对吧

老师，下图是  两个致死处理后样本  的流式结果


我本来以为：活菌和死菌的区分是比较明显的，只是损伤群体和活菌群体不易分清
但是看了您的回复，是不是我划分活死亚群有问题？应该直接圈门吗？

niwanmao

shenzc 发表于 2021-3-24 21:27
老师，下图是  两个致死处理后样本  的流式结果

前面那个所谓「小尾巴」，我觉得应该是与你PI用量与细菌量的比例不一致造成的，跟这里的死菌分布是一样的，所以应该是算死菌的。