查看: 39|回复: 5
收起左侧

[标本处理] 流式检测CAR-T细胞中的CAR表达

[复制链接]
 楼主| 发表于 2021-4-30 09:10:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
有没有老师用流式做过CAR-T细胞中CAR表达检测的,很多文献都是用的protein-L的方法,但是我做过多次试验后发现,普通T细胞加了protein-L和PE后的背景信号也很强,有没有什么试剂可以封闭的?

组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2021-4-30 10:21:33 | 显示全部楼层
是不是洗涤没洗好?我这边做出来分群很好的。
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2021-4-30 10:55:22 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-4-30 10:21
是不是洗涤没洗好?我这边做出来分群很好的。

我每组用了2×10的5次方个细胞,去做的,PBS中含4%的BSA洗涤的,我看文献里面也是要洗很多次,结果T细胞的组信号就很强,CAR-T组的就没办法排除干扰了。 1619751004(1).jpg
Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
发表于 2021-4-30 10:58:21 | 显示全部楼层
风萧易水 发表于 2021-4-30 10:55
我每组用了2×10的5次方个细胞,去做的,PBS中含4%的BSA洗涤的,我看文献里面也是要洗很多次,结果T细胞 ...

你把BSA去掉看看。纯PBS洗涤。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2021-4-30 11:03:15 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-4-30 10:58
你把BSA去掉看看。纯PBS洗涤。

好的,还有一个问题就是冲洗的时候一般是多少毫升的PBS,和洗涤的体积是不是有很大的关系?
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2021-4-30 21:01:14 | 显示全部楼层
风萧易水 发表于 2021-4-30 11:03
好的,还有一个问题就是冲洗的时候一般是多少毫升的PBS,和洗涤的体积是不是有很大的关系? ...

一般常规用2ml。
Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2021-5-8 05:50

Powered by Discuz! X3.4

© 2001-2013 Comsenz Inc.