关于巨噬细胞极化检测

gengren163 · 发表于 2021-5-19 23:07:41

THP-1的基因敲减细胞系（sh-NC、sh-gene）诱导M0后，分别诱导M1、M2极化，流式检测gene在极化中的作用。
机器型号是Beckman cytoflex，2激光4色PE FITC PC5.5 APC。
抗体：

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细胞收取之后，封闭FC，破膜，染色

想请教一下，这个实验需要FMO对照吗，需要FMO的话应该用哪种细胞做？因为CD206要破膜，7-AAD会不会受到影响？
谢谢各位老师

niwanmao · 发表于 2021-5-20 10:04:21

如果要做破膜，建议用商品化并且适合固定样本的死活染料。
需要FMO，主要看你方案里面的靶标分子而定，如果要定义多个分子表达，则做多个FMO。

yuqzhuo@163.com · 发表于 2021-5-20 13:57:02

破膜后肯定不能用7AAD了。有破膜处理得选FVS，zombie这些死活染料排除死细胞吧

gengren163 · 发表于 2021-5-20 18:07:42

好的，谢谢两位老师

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