全血标本淋巴细胞分成了两群

当归

我用紫色EDTA抗凝管收集了血液以后使用servicebio的红细胞裂解液对全血进行裂红，裂红后即进行抗体染色，但是跑出来的流式结果里面淋巴细胞分成了两群，求解答是哪里出现了问题？

                               
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当归

这是图片

niwanmao

当归 发表于 2021-6-6 23:45
这是图片

以前是否出现过？

当归

niwanmao 发表于 2021-6-7 09:13
以前是否出现过？

没有，这是第一次做

当归

同时做了组织样本和全血，组织样本没有出现这种现象，但是全血出现了

tiger

当归 发表于 2021-6-7 13:36
同时做了组织样本和全血，组织样本没有出现这种现象，但是全血出现了

把FCS文件传上来

当归

tiger 发表于 2021-6-7 16:19
把FCS文件传上来

原始文件太大了没法上传，这是网盘地址，求大神赐教！
链接：https://pan.baidu.com/s/1uSGIPwYKZsnOyrjAdDvSuw
提取码：43im
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niwanmao

当归 发表于 2021-6-7 20:10
原始文件太大了没法上传，这是网盘地址，求大神赐教！
链接：https://pan.baidu.com/s/1uSGIPwYKZsnOyrjA ...

看了下其中20210602_gyf_blood_017那个数据，确实有部分细胞变大，与单核区域重叠了。
结合你前面所描述的，暂时还是考虑是裂解液的影响。

闷油瓶

niwanmao 发表于 2021-6-9 09:25
看了下其中20210602_gyf_blood_017那个数据，确实有部分细胞变大，与单核区域重叠了。
结合你前面所描述 ...

有没有是小淋巴细胞的可能？确实有的标本的淋巴细胞会出现两个群体，用CD45染色显示SSC差不多，荧光强度有些差异

niwanmao

闷油瓶 发表于 2021-6-9 17:29
有没有是小淋巴细胞的可能？确实有的标本的淋巴细胞会出现两个群体，用CD45染色显示SSC差不多，荧光强度 ...

从SSC大小来看，小的那群是正常位置。