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[流式相关软件] 细胞周期应用

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 楼主| 发表于 2021-9-4 12:33:18 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位大神,请教大家一下问题:我同时做了3种细胞株,都是相同的病毒进行敲减后的NC和KD之间的比较;镜下看细胞状态都挺好,同时进行细胞固定,70%的酒精4℃固定24h,BD的550825试剂染色15分钟,用BD的C6 plus上机,上机速度控制在150个细胞/s;收集细胞;但是为什么有的细胞株就是不出峰呢?图还特别难看;求各位大神指教;

2021.09.04-.zip

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Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
 楼主| 发表于 2021-9-4 12:45:25 | 显示全部楼层
之前做,那两个不出峰的细胞是可以拟合出图形的,虽然不太典型,这不知道是哪里出了问题,上传一下之前做的周期,大家帮我参谋一下,被这些问题快折磨的不行了

2021.07.16.zip

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发表于 2021-9-5 10:51:56 | 显示全部楼层
你用的是Accuri,Accuri的数据在modfit上分析是存在兼容性问题。

我这边用其它第三方软件,进行缩放后可见,是有明显的G2/M峰的,只是要将PE-A和PE-H放大。不过在拟合模型上,也有个别数据拟合不出,所以只能通过自己在直方图上设门分析比例了。 这里有个问题是,你的细胞是二倍体的还是多倍体的?PE-A和PE-H散点图右上方感觉有点像拖尾。

20210905_104729.jpg
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 楼主| 发表于 3 天前 | 显示全部楼层
倪老师你好,我的细胞是人的细胞,应该是2倍体的;我同期做了3个细胞株,每种细胞分别有2组;有2种细胞就是不出峰;有什么问题是导致细胞不出峰的呢?
你知道活性/增殖/凋亡/焦亡/自噬的区别吗?——点击了解细胞健康检测全面方案
 楼主| 发表于 3 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-9-5 10:51
你用的是Accuri,Accuri的数据在modfit上分析是存在兼容性问题。

我这边用其它第三方软件,进行缩放后可见 ...


倪老师你好,我的细胞是人的细胞,应该是2倍体的;我同期做了3个细胞株,每种细胞分别有2组;有2种细胞就是不出峰;有什么问题是导致细胞不出峰的呢?
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 前天 07:54 | 显示全部楼层
THY 发表于 2021-9-14 20:48
倪老师你好,我的细胞是人的细胞,应该是2倍体的;我同期做了3个细胞株,每种细胞分别有2组;有2种细胞 ...

峰是有的,你仔细看我前面给你的图,只是这个染色有问题,因为第2个峰应该是G2/M峰,但其后面的拖尾太明显了。所以你后续需要在标本处理上再下功夫。
你知道活性/增殖/凋亡/焦亡/自噬的区别吗?——点击了解细胞健康检测全面方案
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