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[功能检测] CD4CD8

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 楼主| 发表于 7 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
我做的是胸腺,脾,血中CD4  CD8  7AAD三染,之前师兄师姐没用CD3,想问一下我的处理方法怎么圈出CD4  CD8双阳双阴单阳单阴的门?下面是圈门图和fcs文件,请教一下

345 脾.PNG
345 胸.PNG
345 血.PNG

45血CD4 CD8 7AAD 100微.zip

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345.zip

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发表于 6 天前 | 显示全部楼层
你们做科研的总是犯同样的问题,放图的时候,坐标上抗体名称总是不写。当你们求助或发文章的时候,如何让其它人判断或帮助你?获取数据的时候,就理应在每个通道上注明抗体名称。
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 楼主| 发表于 3 天前 | 显示全部楼层
本帖最后由 heybibna 于 2021-9-14 13:46 编辑
niwanmao 发表于 2021-9-11 08:31
你们做科研的总是犯同样的问题,放图的时候,坐标上抗体名称总是不写。当你们求助或发文章的时候,如何让其 ...

实在抱歉老师,因为之前没做过,这方面文献看的也少,所以对这个不是太了解,下面这两个图是脾脏和血只敷了CD4CD8做的,想问一下老师怎么能圈出CD4CD8双阳双阴单阳单阴的门?近两年文献都做的是三染或者四染,但是因为之前的师兄师姐只做了CD4CD8没有做CD3,结果也出来了,所以我做的时候按照之前师兄师姐双染的做法做了,可是结果怎么也出不来,想请教一些老师我这个应该怎么圈门?
脾45 .png
血45.PNG

45 脾 100微.zip

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38 血 100微.zip

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发表于 前天 07:52 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-9-14 13:35
实在抱歉老师,因为之前没做过,这方面文献看的也少,所以对这个不是太了解,下面这两个图是脾脏和血只敷 ...

看了下血的数据,那两群阳性的是CD4+和CD8+T,但是不加CD3的话,这个比例是不准确的,因为根据FSC/SSC圈的时候,里面混了很多红细胞碎片,所以需要加CD3,先圈CD3+T细胞,然后再分析CD4和CD8的比例。
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 楼主| 发表于 前天 08:31 | 显示全部楼层
好的老师,血的数据能通过圈门方式,尽量靠近真实值吗,因为数据已经出了一大批了,当时抗体也不好订,所以匆匆忙忙没设计好实验,我还需要这批数据毕业,还有脾的数据有问题吗,老师这个圈门我也不太确定,想问您一下正确的是怎么圈门的?
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发表于 前天 14:25 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-9-15 08:31
好的老师,血的数据能通过圈门方式,尽量靠近真实值吗,因为数据已经出了一大批了,当时抗体也不好订,所以 ...

不太容易。除非你用CD4:CD8比值作为结果了。
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 楼主| 发表于 前天 16:48 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-9-15 14:25
不太容易。除非你用CD4:CD8比值作为结果了。

那老师我要看CD4CD8比值的话,应该怎么圈啊?
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发表于 前天 21:02 | 显示全部楼层
heybibna 发表于 2021-9-15 16:48
那老师我要看CD4CD8比值的话,应该怎么圈啊?

先将CD4和CD8的补偿调到位,然后再圈那两群单阳性的细胞。
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