单细胞悬液制备技巧（物理过滤，EDTA，DNA酶）

zhaocn

样本类型是人解冻的EDTA抗凝血，做流式时细胞经常成团，我现在用的是物理过滤的方法，但是感觉去掉了很多细胞。听说可以用EDTA和DNA酶，但是不知道具体剂量如何操作。不知道各位前辈有没有什么建议？

niwanmao

EDTA已抗凝，仍出现成团，那么你再用EDTA是无效的，因为原因并非钙离子引起，故EDTA解救无效。

从你描述的解冻来看，应该应该是冻存步骤不正确导致细胞死亡太多，所以应该是只能去除死细胞，用DNA酶可有一定效果，但效果也不会太好，因为细胞都死了，只能去掉。

所以建议在细胞保存上解决问题。

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