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[标本处理] 不同抗体组合的CD3+百分比

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 楼主| 发表于 2021-10-19 09:53:43 | 显示全部楼层 |阅读模式
5流星
本帖最后由 susu116 于 2021-10-19 12:14 编辑

同样的样本使用不同的抗体组合,分别是CD3PerCP(SK7)/CD8PE(SK1)/CD45FITC(HI30)和 CD3FITC(SK7)/CD8PE(SK1)/CD45PerCP(HI30),测试CD3+百分比结果不同,请问是什么导致的?哪个测试是准确的呢?

                               
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发表于 2021-10-20 11:59:06 | 显示全部楼层
这种情况一般是碎片排除不充分造成的。可把完整的设门过程都截图放上来看看。
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 楼主| 发表于 2021-10-21 13:16:58 | 显示全部楼层
如图所示

CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP

CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP

CD3PerCP_CD8PE_CD45FITC

CD3PerCP_CD8PE_CD45FITC
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发表于 2021-10-21 21:24:39 | 显示全部楼层

这个比例差异大约为10%左右,我个人觉得还是可接受的。不知道是否做了多次?我相信做20~30例比对,会发现均值会接近的。
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 楼主| 发表于 2021-10-22 08:32:57 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-10-21 21:24
这个比例差异大约为10%左右,我个人觉得还是可接受的。不知道是否做了多次?我相信做20~30例比对,会发 ...

重复30次,均值差异还是在5%左右,这个偏差对绝对计数影响较大,不知道是什么原因导致的。
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发表于 2021-10-22 10:33:25 | 显示全部楼层
susu116 发表于 2021-10-22 08:32
重复30次,均值差异还是在5%左右,这个偏差对绝对计数影响较大,不知道是什么原因导致的。 ...

5%这个差异挺好的,我觉得同一份试剂不同次重复染色上机可能也差不多这样。这样绝对计数也不应该相差大的呀。
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 楼主| 发表于 2021-10-22 12:42:38 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-10-22 10:33
5%这个差异挺好的,我觉得同一份试剂不同次重复染色上机可能也差不多这样。这样绝对计数也不应该相差大 ...

因为使用的是质控血,用CD3FITC/CD8/CD45PerCP和靶值对比绝对差值和绝对计数偏差较大,但是用另外一种抗体组合均在靶值范围内。
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