抗体使用量的问题

叫我团子大人

最近在做PBMC中ILC细胞计数的流式。将2-4ML新鲜血液离心后染色，每次大约总计收1*10e7个细胞还能有残留。
然而分群不是很舒服，所以在考虑是不是可能是抗体用量的问题。
查资料时候，BD bioscience抗体上用量的意思是5ul/per test请问是什么意思呢？
看到一个说法是per test是指1*10e6个细胞/100ul，我如果1*10e7/ml，那么需要50ul抗体？也还有看到一种说法是指该抗体的使用浓度是5ul/ml？
所以想询问下各位，我收的细胞较多的时候，该如何进行滴定实验，大致抗体量需要多少，麻烦了。

scaleus

https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... amp;_dsign=b9e9d606
https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... amp;_dsign=189d4fa5
可以站内搜索：滴定

另外1*10e6个细胞/100ul是指把1*10e6个细胞放在100μ的体系里染色。你有1*10e7个细胞同样也可以放在100μ的体系里染色，那抗体的用量就也是5μ。具体最终用什么浓度的抗体还需要你进行滴定

叫我团子大人

scaleus 发表于 2021-11-23 16:56
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=5746&highlight=%E6%BB%B4%E5%AE%9A&_dsign=b9 ...

这个意思是不是我染色的时候，需要加100ulPBS悬浮这1*10e7个细胞，然后加5ul抗体去染色？第一个讲滴定的帖子因为积分不够没法看，充值也一直显示错误，非常头疼

scaleus

叫我团子大人 发表于 2021-11-23 18:08
这个意思是不是我染色的时候，需要加100ulPBS悬浮这1*10e7个细胞，然后加5ul抗体去染色？第一个讲滴定的 ...

是的。。。。

scaleus

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