查看: 65|回复: 4
收起左侧

[标本处理] 抗体使用量的问题

[复制链接]
 楼主| 发表于 6 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
10流星
最近在做PBMC中ILC细胞计数的流式。将2-4ML新鲜血液离心后染色,每次大约总计收1*10e7个细胞还能有残留。
然而分群不是很舒服,所以在考虑是不是可能是抗体用量的问题。
查资料时候,BD bioscience抗体上用量的意思是5ul/per test请问是什么意思呢?
看到一个说法是per test是指1*10e6个细胞/100ul,我如果1*10e7/ml,那么需要50ul抗体?也还有看到一种说法是指该抗体的使用浓度是5ul/ml?
所以想询问下各位,我收的细胞较多的时候,该如何进行滴定实验,大致抗体量需要多少,麻烦了。

Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
发表于 6 天前 | 显示全部楼层
https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... amp;_dsign=b9e9d606
https://www.flowcyto.cn/bbs/foru ... amp;_dsign=189d4fa5
可以站内搜索:滴定

另外1*10e6个细胞/100ul是指把1*10e6个细胞放在100μ的体系里染色。你有1*10e7个细胞同样也可以放在100μ的体系里染色,那抗体的用量就也是5μ。具体最终用什么浓度的抗体还需要你进行滴定
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 6 天前 | 显示全部楼层
scaleus 发表于 2021-11-23 16:56
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=5746&highlight=%E6%BB%B4%E5%AE%9A&_dsign=b9 ...

这个意思是不是我染色的时候,需要加100ulPBS悬浮这1*10e7个细胞,然后加5ul抗体去染色?第一个讲滴定的帖子因为积分不够没法看,充值也一直显示错误,非常头疼
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 6 天前 | 显示全部楼层
叫我团子大人 发表于 2021-11-23 18:08
这个意思是不是我染色的时候,需要加100ulPBS悬浮这1*10e7个细胞,然后加5ul抗体去染色?第一个讲滴定的 ...

是的。。。。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 6 天前 | 显示全部楼层
你发帖悬赏了太多积分 低于50就看不了了
Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2021-11-29 11:37

Powered by Discuz! X3.4

© 2001-2013 Comsenz Inc.