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[结构和原理] 关于淋巴结及脾脏中T细胞CD44 CD62L的疑问

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 楼主| 发表于 5 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师好,近期我在分析淋巴结及脾脏中CD4SP CD8SP细胞CD44 CD62L分群时,怪的是我的分群总会有一群CD44 CD62L DN的细胞群,很是不解,希望老师们能够解答,先前分析可能CD44的抗体稀释比例太高,本次实验缩小了抗体比例,但效果仍不佳

脾脏

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淋巴结

淋巴结

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冻存确实有时候会影响一些特殊标记。
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 楼主| 发表于 3 天前 | 显示全部楼层
初步怀疑为冻存后37摄氏度水浴复苏后导致CD62L部分降解,本次采用新鲜的的淋巴结和脾脏细胞,全程4摄氏度处理,可得到正常的外周T细胞发育分群图AA
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发表于 5 天前 | 显示全部楼层
Climber 发表于 2021-11-26 14:40
我这边找到的原因是温度问题导致CD62L的部分降解,通过新鲜的脾脏、淋巴结全程4℃处理后可获得正常的分群 ...

冻存确实有时候会影响一些特殊标记。
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 楼主| 发表于 5 天前 | 显示全部楼层
本帖最后由 Climber 于 2021-11-24 19:52 编辑

本次细胞为冻存后复苏细胞
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 楼主| 发表于 5 天前 | 显示全部楼层
本帖最后由 Climber 于 2021-11-24 19:52 编辑

冻存复苏的细胞同时也有大量的死细胞,各位老师将就看哈,非常抱歉
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发表于 5 天前 | 显示全部楼层
同问,我也经常出现这样的情况。而且我的还是新鲜制备的脾脏细胞
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
这些应该算Effector T
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-25 09:16
这些应该算Effector T

嗯,但是标准的Effector T cell应该是CD44hi 但是我的分群CD44lo 但我没有找到具体的原因
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 楼主| 发表于 3 天前 | 显示全部楼层
半年y 发表于 2021-11-24 23:55
同问,我也经常出现这样的情况。而且我的还是新鲜制备的脾脏细胞

我这边找到的原因是温度问题导致CD62L的部分降解,通过新鲜的脾脏、淋巴结全程4℃处理后可获得正常的分群 图,帖子内有我刚做的结果
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