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[标本处理] 树鼩外周血淋巴细胞分两群

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 楼主| 发表于 5 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师大家好,树鼩外周血FSC&SSC图,淋巴细胞之前都是一群,这两次做的有时会分两群,有时还是比较集中。具体变化:这两次我染了FVS 780死活染料,缓冲液由PBS(自配)换成含1%BSA的PBS(自配),仪器和其他流程无变化,使用的一直是索莱宝的红细胞裂解液(R1010)
问题:什么原因导致分成两群?两群都圈起来分析是否有什么影响?





之前

之前

这里淋巴细胞该圈哪一群

这里淋巴细胞该圈哪一群

这次做的分群

这次做的分群

这次做的较集中

这次做的较集中
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
分成两群的,一般是操作时细胞凋亡的缘故,FVS染料分群如何?
PS:每个图上面的碎片都太多了,建议提高FSC的阈值。
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-25 09:18
分成两群的,一般是操作时细胞凋亡的缘故,FVS染料分群如何?
PS:每个图上面的碎片都太多了,建议提高FSC ...

1和2是同次处理的
3和4是上次处理的,过程中确实出现因样品太多裂解有时间差的问题

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组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 4 天前 | 显示全部楼层
陈信宏的小可爱 发表于 2021-11-25 15:53
1和2是同次处理的
3和4是上次处理的,过程中确实出现因样品太多裂解有时间差的问题 ...

掌握好裂解时间,并且操作轻柔一些,问题就不会太大。
你知道活性/增殖/凋亡/焦亡/自噬的区别吗?——点击了解细胞健康检测全面方案
 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-25 16:58
掌握好裂解时间,并且操作轻柔一些,问题就不会太大。

谢谢倪老师,请问这样分了两群的淋巴细胞能都圈起来分析吗?(或者说这样的样本还能正常分析吗)
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2021-11-25 16:58
掌握好裂解时间,并且操作轻柔一些,问题就不会太大。

谢谢倪老师,请问这样分了两群的淋巴细胞能都圈起来分析吗?(或者说这样的样本还能正常分析吗)
你知道活性/增殖/凋亡/焦亡/自噬的区别吗?——点击了解细胞健康检测全面方案
发表于 4 天前 | 显示全部楼层
陈信宏的小可爱 发表于 2021-11-25 17:29
谢谢倪老师,请问这样分了两群的淋巴细胞能都圈起来分析吗?(或者说这样的样本还能正常分析吗)
...

可以分析。
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层

谢谢倪老师的指导
Bangslabs、Spherotech流式微球,帮您做好仪器设置、QC、荧光定量、细胞周期
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