人外周血中性粒细胞和单核巨噬细胞圈门策略

YYL

请教下各位老师，人外周血裂解红细胞后培养几天现在想圈性粒细胞和单核巨噬细胞，需要配那几个色呢，具体圈门怎么圈呢？

niwanmao

最简单的，标一个CD45，通过CD45/SSC圈。
复杂点的，CD45结合中性粒特异性标记、单核/巨噬细胞特异性标记。

chen249146827

niwanmao 发表于 2021-12-10 19:48
最简单的，标一个CD45，通过CD45/SSC圈。
复杂点的，CD45结合中性粒特异性标记、单核/巨噬细胞特异性标记。 ...

老师，想请教一下如果人的外周血仅仅只裂红后冻存，复苏之后染单核/巨噬、中性粒和T细胞，其他的都能染出来，中性粒的CD66b指标染不出来是什么原因呢？

YYL

niwanmao 发表于 2021-12-10 19:48
最简单的，标一个CD45，通过CD45/SSC圈。
复杂点的，CD45结合中性粒特异性标记、单核/巨噬细胞特异性标记。 ...

我没有染CD45，染了CD11b,CD14,CD16,三个色，可以用CD11b+CD14+圈单核细胞，CD16+圈中性粒细胞吗？

niwanmao

YYL 发表于 2022-1-4 11:35
我没有染CD45，染了CD11b,CD14,CD16,三个色，可以用CD11b+CD14+圈单核细胞，CD16+圈中性粒细胞吗？ ...

可以。

YYL

niwanmao 发表于 2022-1-4 15:09
可以。

我最后按照这样圈的，中性粒：CD14-CD16+,  单核：CD11b+CD14+。但是我看到文章说单核中有一类也是 CD14-CD16++,那这样圈还可以吗？老师。

niwanmao

YYL 发表于 2022-1-7 11:34
我最后按照这样圈的，中性粒：CD14-CD16+,  单核：CD11b+CD14+。但是我看到文章说单核中有一类也是 CD14- ...

两者在CD45/SSC的位置上不同。

zhangjunchafff

niwanmao 发表于 2022-1-7 12:32
两者在CD45/SSC的位置上不同。

倪老师，请问这个位置的分布分别对应什么呀？

niwanmao

zhangjunchafff 发表于 2022-1-11 17:47
倪老师，请问这个位置的分布分别对应什么呀？

CD45/SSC散点图上的位置，CD45中等、SSC大的为中性粒，CD45最高而SSC中等的为单核细胞。