PI染色分群问题

cczxgysl

倪老师好，请问我做了钙网蛋白的流式检测，PI染色之后分群不明显，是什么原因导致的呢？另外有一个问题想请教，如果我用 CD45-APC CY7,CD8-PE CY7,CD4 BB700染T细胞，之后再用PI可以吗？

niwanmao

PI浓度多少？染色时间？
PI是应该在表面标记染色完成后，上机前染1分钟即可。

cczxgysl

niwanmao 发表于 2021-12-27 20:01
PI浓度多少？染色时间？
PI是应该在表面标记染色完成后，上机前染1分钟即可。 ...

染色大概五分钟左右就上机了，浓度是2.5ug/ml

niwanmao

cczxgysl 发表于 2021-12-28 10:55
染色大概五分钟左右就上机了，浓度是2.5ug/ml

浓度太低，要求PI的终浓度5ug/ml，注意，是终浓度。1~2分钟左右即可，不超过5分钟。