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[图片] 肥大细胞免疫表型,以及骨髓实例图

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 楼主| 发表于 2022-2-10 15:14:05 | 显示全部楼层 |阅读模式

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通常,肥大细胞在骨髓中很少见(<1%),在自身免疫和过敏反应时可增高。肥大细胞的胞内颗粒含有大量组胺,故在自身免疫或过敏发挥重要作用。
正常肥大细胞表现出非常典型的免疫表型,具有高 CD117、中等 CD33(类似于单核细胞)、中等 CD9 和 CD71、低 CD38 和 CD11b、低到中等 HLA-DR(低于单核细胞和 B 细胞但高于 T 细胞),且 CD34阴性 、CD19阴性,在CD45/SSC散点图上位于正常嗜酸性粒细胞位置附近(CD45略高于粒细胞)。
根据 2016 年 WHO 造血和淋巴肿瘤分类,CD25 的异常表达(伴或不伴CD2表达)被认为是诊断系统性肥大细胞增多症的次要标准,不过该标准不是肿瘤性肥大细胞的证据,因为这种异常的免疫表型可以出现在化疗后,因此在没有系统性肥大细胞增多症的特征性形态学、分子和临床表现的情况下,应谨慎对待。
肥大细胞由于比例低,故在收集数据时,尽量获取到50万个细胞以上,以确保足够的分析灵敏度。
肥大细胞的颗粒多,因此自发荧光会很强,使得检测容易受干扰,尤其是在由紫色 (405 nm) 和蓝色 (488 nm) 激光(主要是 FITC)激发的通道上。不过,通过CD117高表达的设门是可以很容易圈出来的,因为几乎没有其他细胞具有如此高的 CD117 表达。也正因为存在CD117 的高表达,所以在检测其表面异常表达但强度偏弱的标记时,需充分考虑CD117的荧光渗漏。
下面看几幅实际样本。
1- 骨髓样本(绿色的为正常肥大细胞,蓝色为淋巴细胞)
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2- 骨髓样本(绿色为正常肥大细胞)
2022-02-10-15-06-38.png

3- 骨髓样本(绿色为CD25+ 异常肥大细胞)
2022-02-10-15-07-13.png

4- 骨髓样本(绿色为CD2+ 和 CD25+ 异常肥大细胞)
2022-02-10-15-07-39.png

5- 存在KIT D816V突变的骨髓样本(绿色为CD2+ 和 CD25+ 异常肥大细胞)
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6- 同时有正常(绿色)和异常(红色)肥大细胞群的骨髓样本
2022-02-10-15-08-37.png

信源:International Clinical Cytometry Society


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发表于 2022-2-11 13:47:22 | 显示全部楼层
谢谢倪老师分享
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发表于 2022-4-3 16:43:20 | 显示全部楼层
老师我做的这群表型像正常肥大的红色细胞CD45/SS不在嗜酸位置,反而在树突位置。
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 楼主| 发表于 2022-4-3 17:52:47 | 显示全部楼层
happy_zhang1y 发表于 2022-4-3 16:43
老师我做的这群表型像正常肥大的红色细胞CD45/SS不在嗜酸位置,反而在树突位置。 ...

处理手法上的差异,可能会影响脱颗粒程度,不过你这群的45确实不高,可能是不是仪器间的差异。
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发表于 2022-4-3 23:16:28 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2022-4-3 17:52
处理手法上的差异,可能会影响脱颗粒程度,不过你这群的45确实不高,可能是不是仪器间的差异。 ...

那老师还是觉得这群是肥大细胞哈
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发表于 2022-4-3 23:21:09 | 显示全部楼层
我查了一下,肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒都是水溶性的,估计是我的这个样本的肥大细胞颗粒溶于水了。
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 楼主| 发表于 2022-4-4 09:19:14 | 显示全部楼层
happy_zhang1y 发表于 2022-4-3 23:16
那老师还是觉得这群是肥大细胞哈

从CD117强度看,还是应该归到肥大细胞。只是一方面是操作手法,一方面是仪器,导致其位置不经典。
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发表于 2022-4-5 13:35:06 | 显示全部楼层
今天做的这个肥大的FS和SS典型
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 楼主| 发表于 2022-4-5 14:21:17 | 显示全部楼层
happy_zhang1y 发表于 2022-4-5 13:35
今天做的这个肥大的FS和SS典型

这个典型的。
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