关于抗原特异性T细胞细胞因子检测

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我的模版内包含CD154、OX40抗原特异性标志以及IFN-r，TNF-a，IL-2细胞因子，在这一个模版内我要用什么刺激剂作为阳性对照？
PMA离子霉素的话是不是CD154和OX40的刺激效果会不好，PHA的话细胞因子的刺激效果也不太好。

另外 我用PMA 5ng/ml刺激PBMC20小时，按文献的描述BFA过早加会对细胞毒害作用，所以我于第14小时加入BFA，结果细胞因子几乎没有，实验失败的地方可能是哪里呢？

麻烦老师能给我提一些建议 谢谢！

niwanmao

一般是一起加的，参考：
PMA/离子霉素刺激检测Th1和Th17，含CD4下调机制和解决办法
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6801-1-1.html
(出处: 流式中文网)