流式抗体不稳定

liuyinguang · 发表于 2022-4-9 11:57:53

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猪pam细胞中，CD3-pc5.5染色，出现FSC-H大小不同的两群细胞；

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CD45滴定猪脾细胞后，选了0.125这个浓度使用，
随后又实用猪脾细胞，

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发现抗体效果很不稳定，求大神指导。

niwanmao · 发表于 2022-4-9 15:55:19

可以将图传上来。点击「编辑」进入高级模式的编辑框，然后点击工具栏上传图片。

按照描述，CD3分出FSC大小不同的两群，需排除一下是否存在粘连？或者凋亡？

CD45滴定后，再染，发现抗体效果不稳定，这个很可能与你使用的染色体积、细胞数量等因素有关，如果这两个因素能够和滴定的时候保持一致，不会不稳定的。

liuyinguang · 发表于 2022-4-10 15:34:42

这是之前抗体滴定的结果

liuyinguang · 发表于 2022-4-10 15:36:25

这是最近一次染色的结果。细胞量相对减少，会影响细胞分群吗？

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[标本处理] 流式抗体不稳定